[发明专利]用于在真菌细胞中表达基因的启动子

权利要求书

1.制备多肽的方法，包括：

(a)在有利于该多肽产生的培养基中培养真菌宿主细胞，其中该真菌宿主细胞含有编码该多肽的第一核酸序列和与该第一核酸序列可操作地连接的、含有与第一核酸序列异源的启动子的第二核酸序列，其中该启动子含有选自下组的序列：SEQ ID NO.1的第1-3949位核苷酸、SEQID NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ ID NO.3的第1-3060位核苷酸，及其子序列；和它们的突变、杂合及串联启动子；和

(b)从该培养基分离该多肽。

2.权利要求1的方法，其中该启动子含有SEQ ID NO.1第1-3949位核苷酸或其突变、杂合或串联启动子的核酸序列。

3.权利要求2的方法，其中该启动子含有SEQ ID NO.1第1-3949位核苷酸的核酸序列。

4.权利要求3的方法，其中该启动子含有大肠杆菌NRRL B-30067中的质粒pECO3所包含的核酸序列。

5.权利要求1的方法，其中该启动子含有SEQ ID NO.2第1-938位核苷酸或其突变、杂合或串联启动子的核酸序列。

6.权利要求5的方法，其中该启动子含有SEQ ID NO.2第1-938位核苷酸的核酸序列。

7.权利要求6的方法，其中该启动子含有大肠杆菌NRRL B-30071中的质粒pFAMG所包含的核酸序列。

8.权利要求1的方法，其中该启动子含有SEQ ID NO.3第1-3060位核苷酸，其子序列；或其突变、杂合或串联启动子的核酸序列。

9.权利要求8的方法，其中该启动子含有SEQ ID NO.3第1-3060位核苷酸的核酸序列。

10.权利要求9的方法，其中该启动子含有大肠杆菌NRRL B-30075中的质粒pQUINN所包含的核酸序列。

11.权利要求1、2、5和8之任意一项的方法，其中该突变启动子由含有一或多个核苷酸替代、缺失和/或插入的选自下组的启动子组成：SEQ IDNO.1的第1-3949位核苷酸、SEQ ID NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ IDNO.3的第1-3060位核苷酸，其中该突变启动子比相应的启动子具有较强或较弱的启动子活性。

12.权利要求1、2、5和8之任意一项的方法，其中该杂合启动子由两个或更多个启动子的部分组成。

13.权利要求12的方法，其中该杂合启动子含有一或多个选自下组的部分：SEQ ID NO.1的第1-3949位核苷酸、SEQ ID NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ ID NO.3的第1-3060位核苷酸。

14.权利要求13的方法，其中该杂合启动子还含有另一启动子的部分。

15.权利要求1的方法，其中该串联启动子由两个或多个启动子组成。

16.权利要求15的方法，其中该串联启动子含有两个或更多个选自下组的启动子：SEQ ID NO.1的第1-3949位核苷酸、SEQ ID NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ ID NO.3的第1-3060位核苷酸。

17.权利要求16的方法，其中该串联启动子还含有另一启动子。

18.权利要求15的方法，其中该串联启动子的两个或更多个启动子同时启动所述核酸序列的转录。

19.权利要求15的方法，其中该串联启动子的两个或更多个启动子中的一或多个在所述真菌宿主细胞的不同生长阶段启动所述核酸序列的转录。

20.权利要求1-19之任意一项的方法，其中该真菌宿主细胞含有一或多个拷贝的所述核酸序列。

21.权利要求1-19之任意一项的方法，其中该真菌宿主细胞含有一个拷贝的所述核酸序列。

22.权利要求1-21之任意一项的方法，其中所述核酸序列编码与该真菌宿主细胞异源的多肽。