[发明专利]新的器官阴离子转运蛋白无效
申请号: | 00807838.6 | 申请日: | 2000-05-19 |
公开(公告)号: | CN1351612A | 公开(公告)日: | 2002-05-29 |
发明(设计)人: | T·G·基尔克格斯纳;B·斯昂;Y·朱;Y·吴;Z·王;J·S·林奇;X·黄;W·P·杨 | 申请(专利权)人: | 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K16/18;A61K38/16;A61K38/17;G01N33/53;G01N33/567;C12N5/10;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 张广育,刘玥 |
地址: | 美国新*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 器官 阴离子 转运 蛋白 | ||
1.一种经分离纯化的编码全部或部分器官阴离子转运蛋白(“OATP”)的核酸序列,所述的OATP包括选自下列组中的氨基酸序列:SEQ ID NO:2(OATP2),SEQ IDNO:4(OATP-RP2),SEQ ID NO:6(OATP-RP3),SEQ ID NO:8(OATP-RP4),SEQ ID NO:10(OATP-RP5),和SEQ ID NO:12(OATP-RP1)。
2.如权利要求1所述的核酸序列,包含(a)选自下列组中的核酸序列:SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:9,和SEQ ID NO:11;(b)(a)项中的编码区;(c)(a)或(b)项中序列的互补序列;或(d)由于遗传密码的简并性与(a),(b)或(c)有区别的核酸序列。
3.一种表达载体,包含如权利要求1或2所述核酸分子以及有效的与核酸分子相连接的表达控制序列。
4.一种经转化的宿主细胞,包括一种表达载体,该表达载体包含如权利要求1或2所述核酸分子以及有效的与核酸分子相连接的表达控制序列。
5.一种OATP蛋白,包括选自下述组中的氨基酸序列:SEQ ID NO:2(OATP2),SEQ NO:4(OATP-RP2),SEQ ID NO:6(OATP-RP3),SEQID NO:8(OATP-RP4),SEQ ID NO:10(OATP-RP5),和SEQ ID NO:12(OATP-RP1)。
6.经修饰的OATP蛋白,包括如权利要求5中所述的OATP蛋白,该蛋白保持了权利要求5中所述的OATP蛋白的活性,但至少包括一个氨基酸的替换或缺失。
7.生产OATP的方法,所述方法包括下列步骤:
a)将如权利要求1或2所述的编码OATP蛋白或其同源物的核酸序列插入合适的表达载体,
b)将所述表达载体转染合适的转染宿主细胞,
c)在合适的培养基中培养所述的经转染的宿主细胞,
d)从上述培养基中纯化OATP蛋白或其同源物。
8.经分离的核酸序列,该核酸序列在严紧条件下可与如权利要求1或2所述的核酸序列杂交,其中所述核酸序列至少包括选自SEQID NO:1,SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:11中的连续的18个核苷酸。
9.如权利要求5所述的OATP的特异抗体。
10.如权利要求9所述的抗体,其特征在于所述抗体为单克隆抗体。
11.权利要求5所述的OATP的生产方法,包括:
a)将编码所述OATP的核酸序列插入合适的表达载体,
b)将上述表达载体转染合适的转染宿主细胞,
c)在合适的培养基中培养所述的经转染的宿主细胞,
d)从上述培养基中纯化OATP蛋白。
12.鉴定能与如权利要求5所述的OATP,或其中一部分相结合的配基的方法,该方法包括下列步骤:
a)在允许配基-OATP复合物形成的条件下,使所述OATP,或所述OATP的一部分与所述配基反应,所述配基潜在地能与所述OATP,或所述OATP的一部分相结合;
b)对配基-OATP复合物,自由配基和非结合OATP进行分析。
13.鉴定能由如权利要求5中所述OATP或所述OATP的一部分转运的底物的方法,该方法包括下列步骤:
a)在允许所述底物穿过细胞膜的条件下,使所述OATP,或所述OATP的一部分与所述底物反应,所述底物潜在地能与所述OATP,或所述OATP的一部分相结合;
b)对所述底物穿越细胞膜的运动进行分析。
14.向表达如权利要求5所述的OATP蛋白的器官运送分子的方法,该方法包括
a)鉴定可由所述OATP转运的底物,
b)将待转运的分子与底物相结合形成底物-分子融合复合物,
c)将所述底物-分子融合复合物提供给所述器官。
15.一种融合蛋白,该融合蛋白包括全部或部分如权利要求5所述的OATP,其与另一种多肽相结合。
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