[发明专利]新的器官阴离子转运蛋白

说明书

本申请要求1999年5月20号提交的美国申请的优先权，该申请的申请号为60/135,081，并在此将该申请全文引入作为参考。

发明领域

本发明要求保护经分离的编码全部或部分新的器官阴离子转运蛋白(“OATP”)的核酸序列，所述新的器官阴离子转运蛋白命名为OATP2，OATP-RP1，OATP-RP2，OATP-RP3，OATP-RP4和OATP-RP5。同时要求保护含上述核酸序列的载体，含所述载体的宿主细胞，以及具有OATP2，OATP-RP1，OATP-RP2，OATP-RP3，OATP-RP4和OATP-RP5全部或部分氨基酸序列的多肽。发明还描述了表达上述转运蛋白的组织表达和上述转运蛋白的一些底物。本发明还要求保护这些新的OATP-RP2的用途，包括：对特定组织的靶向药物中的应用，调节内源底物的浓度中的应用，以及验证可由本发明中的新OATP所转运的底物。

发明背景

肝执行对多种代谢物、药物和其它异生素的清理功能是通过将其转运穿过窦状隙膜进入肝细胞来完成的。目前已公开了几种介导这些过程的转运系统，包括人和大鼠肝中的Na⁺/牛磺胆酸协同转运多肽，NTCP，(Hagenbuch，B.，等(1991)美国国家科学院院刊(Proc.znatl.Acad.Sci.USA)88：10629-33；Hagenbuch，B.，等(1994)J.Clin.Invest.93：1326-31)和器官阴离子转运多肽家族(OATPs)，该家族一般在肝，肾和脑中表达，并以非钠依赖方式转运大范围的底物(Meier，P.J.，等，(1997)肝学，26：1667-77；Wolkoff，A.W.，(1996)Semin.Liver Dis.16：121-127)。人们认为，这后一转运蛋白家族在肝，肾和脑的脉络膜中的分布反映出：通常这些器官对清理大量器官阴离子的生理需求。在大鼠中有三种OATP同功型：roatp1(Jacquemin，E.，等，(1994)美国国家科学院院刊(Proc.znatl.Acad.Sci.USA)91：133-37)；roatp2(Noe，B.A.等，(1997)美国国家科学院院刊(Proc.znatl.Acad.Sci.USA)94：10346-50；)和roapt3(Abe，T.，等(1998)生物化学杂志273：11395-401)。除胆汁酸外，已知OATPs可转运多种其它化合物。因不同的转运蛋白而异，它们包括，结合或非结合的类固醇，例如，硫酸雌酮，雌二醇-17B-葡糖苷酸，醛甾酮，心苷，(Boussuyt，X.，等(1996)J.Pharmacol.Exp.Ther.276：891-6；Boussuyt，X.(1996)J.Hepatol.25：733-8；Kanai，N.，等，(1996))Am.J.Physiol.270：F319-F325；Kanai，N.等(1996)Am.J.Physiol.270：F326-F331；Noe，B.A.，等，(1997)美国国家科学院院刊(Proc.znatl.Acad.Sci.USA)94：10346-50)。四溴酚酞磺酸钠(Jacquemin，E.，等，(1994)美国国家科学院院刊(Proc.znatl.Acad.Sci.USA)91：133-7)；真菌毒素(Kontaxi，M.，等，(1996)J.Pharmacol.Exp.Ther.279：1507-13)；白三烯(Li，L.，等，(1998)生物化学杂志273：16184-91)；和甲状腺激素(Abe，T.，等(1998)生物化学杂志273：11395)是附加底物。

已经有几种蛋白得到鉴定。Jacquemin，E.，等在美国国家科学院院刊(Proc.znatl.Acad.Sci.USA)，91：133-137中报道了首次被克隆和验证的OATP转运蛋白家族成员，命名为rat oatp1。首次被克隆和验证的人OATP是由Kullak-Ublick，G.A.等(1995)在肠胃学，109：1274-1282上报道的。在肝，肾和脑和其它器官中均发现有该蛋白表达。作者得出结论，基于底物特异性，该蛋白不是rat oatp1的人同系蛋白。

Kullak-Ublick，G.A.等(1994)在肝学，20：411-416中讨论了rat oatp1的底物特异性，而Bossuyt，X.，等在肝学杂志，25：733-738中讨论了人OATP的底物特异性。