[发明专利]一种包埋抗癌药物的微胶囊的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备层-层组装微胶囊及用该微胶囊包埋抗癌药物的方法，尤其是一种具有良好水分散性、储存稳定性和缓释性能的微胶囊及其制备技术。

技术背景

在临床实践中，治疗肿瘤的一个常规方法是化疗，即用化学药物进行肿瘤的治疗。柔红霉素和阿霉素能嵌入DNA双螺旋中与DNA结合，使其模板发生改变，抑制DNA和RNA聚合酶，阻止DNA和RNA的合成，为细胞周期非特异性药物。临床用于急、慢性白血病，恶性淋巴瘤、胃癌、肝癌等，为广谱抗癌药物。然而，这两种药物毒性较大，除了能够杀死癌细胞之外，对正常细胞也有强烈的杀伤作用。因此，给药时有必要采取一定措施使血药浓度低于一定水平，并常常采用药物的缓释技术来实现。

通常用于药物缓释的微囊和微球制剂由乳液方法加以制备。由于有机溶剂和乳化剂的使用，不仅可能造成环境污染，而且不能保证完全除去制剂中对人体有害的有机溶剂和乳化剂。另外，乳液法制备的微囊或微球的通透性以及缓释性能通常难以在微观尺度上加以调控。因此，找到一种具备环境友好、缓释性能可精确调控，并具有良好综合性能的药物载体，是极具挑战性的工作。

采用层一层自组装方法制备的微胶囊，其制备过程在水中进行，可避免对环境的污染。微胶囊尺寸由模板精确控制，而其壁厚可控制在纳米尺度内，通过调整囊壁厚度，即可精确调控微胶囊的渗透性以及缓释性能。

发明内容

本发明的目的是提供一种包埋抗癌药物的微胶囊的制备方法，将抗癌药物包埋于微胶囊内，并具有良好的药物缓释性能，制备过程无环境污染。

本发明的包埋抗癌药物的原理，是利用在形成胶体微粒过程中，在胶体微粒内部预先引入聚电解质微凝胶来实现抗癌药物在微胶囊中包埋。

本发明包括以下步骤：

1)在浓度为0.001-0.1M/L的含钙无机盐水溶液中加入带有负电荷的聚电解质，搅拌下加入浓度为0.001-0.1M/L的含碳酸根无机盐水溶液，带负电荷的聚电解质在混合物中的终浓度为1～10mg/mL，搅拌下反应1～30分钟，离心过滤，得内部含有带负电荷聚电解质的CaCO₃胶体微粒；

2)在0.2～0.5M/L的NaCl溶液中，将浓度为1～2mg/mL的具有正电荷的聚电解质与步骤1)的CaCO₃胶体微粒混和，离心弃上清液，再加入水使CaCO₃胶体微粒重新分散，离心弃上清液，如此用水反复洗涤，得到第一层包覆有带正电的聚电解质的CaCO₃胶体微粒；再在0.2～0.5M/L的NaCl溶液中，将CaCO₃胶体微粒加入浓度为1～2mg/mL的具有负电荷的聚电解质，离心弃上清液，再加入水使CaCO₃胶体微粒重新分散，离心弃上清液，如此用水反复洗涤，得到第二层包覆有带负电的聚电解质；重复以上过程，按预期的层数分别将带有正电和负电的聚电解质层层自组装，得到核-壳结构的胶体微粒，通过溶解或分解方法去除CaCO₃胶体微粒，得到中空微胶囊，微胶囊中含有预先包埋到微粒中的荷负电的聚电解质；

3)在4～70℃温度下，将步骤2)所得的中空微胶囊在浓度为0.01～500mg/mL的抗癌药物的水溶液中孵化0.5～12小时，使药物包埋到微胶囊中，得到载药微胶囊；，

本发明中，所说的含钙无机盐可以是硝酸钙或氯化钙，含碳酸根无机盐可以是碳酸钠或碳酸氢氨。所说的分解去除CaCO₃胶体微粒可以采用盐酸分解或乙二胺四乙酸络合。所说的抗癌药物是柔红霉素或阿霉素。

本发明中，所说的带负电荷的聚电解质是聚苯乙烯磺酸钠。所说的带正电的聚电解质可以采用聚烯丙基胺盐酸盐或接枝有聚乙二醇的聚烯丙基胺盐酸盐。通常为提高微胶囊的生物相容性，采用接枝有聚乙二醇的聚烯丙基胺盐酸盐为好。

上述接枝有聚乙二醇的聚烯丙基胺盐酸盐通过如下步骤合成得到：

1)将1～50mg/mL对甲苯磺酰氯的吡啶溶液搅拌下加入1～100mg/mL的单甲氧基聚乙二醇的二氯甲烷溶液中，室温下反应1～12小时；

2)取1～5mmol活化的聚乙二醇搅拌加入到1～100mg/mL的聚烯丙基胺盐酸盐溶液中，室温反应1～24小时；

3)将得到的反应产物透析除去小分子杂质，冷冻干燥后得终产物聚烯丙基胺接枝聚乙二醇；

通过改变聚电解质组装的层数或者改变聚电解质溶液中NaCl的浓度，可在纳米尺度精确调控微胶囊的囊壁微结构和厚度，从而达到控制药物释放的速度。

本发明的优点在于：