[发明专利]用于纯化含咕啉分子的方法

权利要求书

1.用于纯化含咕啉化合物的吸附剂材料，其中所述吸附剂材料：

·包含四唑作为官能团，

和/或

·由包含下述步骤的方法得到：

i)提供包含氰化物的活化基质，和

ii)用包含叠氮化合物的溶液处理所述基质，

和/或

·具有[β]-特异性官能团，其中所述官能团在pH 3～7.5、5℃～60℃与CbI-OH₂结合，其K_d小于100μM，并且其中所述吸附剂材料不引起所述含咕啉化合物的减少或破坏。

2.权利要求1的吸附剂材料，其中所述含咕啉化合物是钴胺素或其类似物。

3.前述任一项权利要求的吸附剂材料，其中所述含咕啉分子是含咕啉化合物的含水形式优选含水-钴胺素，或者与含咕啉化合物的含水-形式相平衡的含咕啉化合物的形式。

4.前述任一项权利要求的吸附剂材料，其中所述吸附剂材料在pH 3～7.5、5℃～60℃与CbI-OH₂结合，其K_d为0.01～100μM，例如Kd为0.1～50μM，如Kd为0.5～20μM，如Kd为1～7μM。

5.前述任一项权利要求的吸附剂材料，其中当通过重力装载在柱中时，所述吸附剂材料具有最大的饱和剂量，即在每升的吸附剂材料中有0.1～500mmol、例如0.5～100mmol、例如1～50mmol、例如4～8mmol的含咕啉化合物。

6.前述任一项权利要求的吸附剂材料，其中所述活化基质为CNBr-活化的琼脂糖。

7.用于制备在上述任一项权利要求中定义的吸附剂材料的方法，其包括使四唑基团与基质相连，或在基质上引发四唑基团的形成。

8.权利要求7的方法，其中所述基质为环氧琼脂糖6B、CM琼脂糖或羧基-安伯莱特(Amberlite)IRC76。

9.用于制备在上述权利要求1-6中任一项定义的吸附剂材料的方法，其包括下述步骤：

i)提供包含氰化物的活化基质，和

ii)用包含叠氮化合物的溶液处理所述基质。

10.用于从溶液中纯化含咕啉化合物的方法，其包括下述步骤：

i)提供包含含咕啉化合物的溶液，

ii)提供权利要求1-6中任一项定义的吸附剂材料，

iii)将所述溶液暴露于所述吸附剂材料中，

iv)从没有被吸附到吸附剂材料上的溶液的成分中分离与所述吸附剂材料结合的含咕啉化合物的复合物，

v)任选地进行洗涤，以及

vi)从所述吸附剂材料中洗脱所述含咕啉化合物。

11.权利要求10的方法，其中所述含咕啉化合物是钴胺素或其类似物。

12.权利要求10或11的方法，其中所述含咕啉分子是含咕啉化合物的含水形式优选含水-钴胺素，或者与含咕啉化合物的含水-形式相平衡的含咕啉化合物的形式。

13.权利要求10～12中任一项的方法，其包括在步骤iii)之前和/或之中将所述溶液暴露在光中。

14.权利要求10～13中任一项的方法，其包括在步骤iii)之前对所述溶液进行预处理以将含咕啉化合物从与其它分子如蛋白质的复合物中释放出来。

15.权利要求14的方法，其中所述预处理通过加热所述溶液进行。

16.权利要求10～15中任一项的方法，其中在步骤iii)中的暴露是在pH 3～7之间进行。

17.权利要求10～16中任一项的方法，其中步骤iii)和iv)包含使所述溶液通过包含所述吸附剂材料的柱。

18.权利要求10～17中任一项的方法，其中步骤vi)包含使用氰化物(CN^-)溶液。

19.权利要求18的方法，其中步骤vi)在pH 7-12中进行。

20.权利要求18或19的方法，其中转化为单氰基形式的步骤是在步骤vi)之后例如通过酸化进行。