[发明专利]一种凝血酶的提取分离方法

权利要求书

1、一种凝血酶的提取分离方法，该方法有下述顺序的步骤：

a、以牛血液或猪血液为原料，在此血液中加入3.8％W/V的柠檬酸钠作为抗凝剂，搅拌均匀，然后用4000转/分钟，离心20分钟，获得血浆；

b、将获得的血浆用去离子水以体积比稀释9～10倍，用2mol/L醋酸调节pH值为5.30，在4～5℃下，静置10～12小时，再用4000转/分钟，离心20分钟，沉降后弃去上清液，获得凝血酶原沉淀；

c、将获得的凝血酶原沉淀，用含1.5％～2.0％W/V CaCl₂的去离子水溶解，在4～5℃下放置1.5小时，然后用4000转/分钟，离心20分钟，沉降后弃去沉淀物，获得上清液；

d、将获得的上清液放在37℃水浴中搅拌，加入10％～15％W/V(NH₄)₂SO₄，生成CaSO₄沉淀吸附溶液中的凝血酶，静置30分钟，用4000转/分钟，离心20分钟，沉降后弃去上清液，收集沉淀物；

e、将收集的沉淀物用pH值为7.30的0.9％W/V生理盐水洗脱，然后用4000转/分钟，离心20分钟，沉降后弃去沉淀物获得凝血酶溶液；

f、将获得的凝血酶溶液用超滤器对其进行浓缩，冷冻干燥，获得白色的凝血酶冻干粉。