[发明专利]不论存在或不存在相对应的治疗用抗体而检测靶抗原

说明书

本发明涉及不论存在或不存在相对应的治疗用抗体而检测靶抗原的方法。本发明特别涉及在存在相对应的治疗用抗体时检测靶抗原。本发明公开检测治疗用抗体在样品中的靶抗原的方法，所述方法包括下述步骤：a)提供待分析的样品，b)在适合所述治疗用抗体与所述靶抗原结合的条件下，将所述样品与所述治疗用抗体温育，由此形成靶抗原-治疗用抗体-复合物，和c)检测在(b)中形成的复合物。本发明还涉及所述方法在患者随访中的应用。

发明背景

自从1974年Khler和Milstein开发第一种单克隆抗体以来，已经有许多努力致力于开发适用于人类治疗的抗体。可用的第一种单克隆抗体已经在小鼠和大鼠中开发。当用于人类治疗时，由于抗-啮齿动物抗体，这些抗体带来不需要的副作用。已经有许多努力致力于减少或者甚至消除所述不需要的副作用。

在过去十年里，不断增长数量的人单克隆抗体或人源化单克隆抗体已经进入市场。公知的实例包括，例如，来自Hoffmann-La Roche，Basel(霍夫曼-拉罗奇有限公司，巴塞尔)的Herceptin和MabThera。

非常显著数量的人或人源化单克隆抗体正在研究中，并且在出于第一试验目的可以考虑进入人类之前需要在实验动物中进行研究。

治疗单克隆抗体典型地必须以在约1ng/ml-约100μg/ml范围的血清水平应用。所述治疗用抗体，因此至少在治疗方案中的特定时间点，以非常高的浓度存在，例如，以与相对应的靶抗原的浓度同样高或者甚至更高的浓度存在。

认为准确检测靶抗原本身是非常重要的，尤其是在治疗后并且特别是在用相对应的治疗用抗体治疗后的患者随访中。由于在治疗方案的疗程中，治疗用抗体的浓度将在很大程度上变化，所以在为检测其相对应的靶抗原所建立的检测中对所述治疗用抗体的任何干扰可能并且非常可能将导致对所述靶抗原的假检测。

靶抗原的水平可以通过任何适当的方法检测。在临床途径中，在大多数情形中所述方法将应用针对所述靶抗原的抗体，所谓的免疫测定。高和/或可变浓度的治疗用抗体可能干扰用于检测其靶抗原水平的免疫测定。

正如熟练的技术人员应该容易地理解，在检测其相对应的靶抗原中使用治疗用抗体本身是不可能的，或者至少不是容易的任务。如果所述治疗用抗体和用于免疫测定的至少一种抗体结合靶抗原的同一表位，那么将经常遇到相同的困难。然而这一事实是公知的并且普遍接受的，现在已经惊讶地发现，即使所述治疗用抗体结合这样的表位，即所述表位不与在用于相对应的靶抗原的免疫测定中所用的一种或多种抗体结合，但是用于检测靶抗原的免疫测定还可以受到存在或不存在治疗用抗体的危害。

Jilani等(Jilani，I.等，Blood(血液学)1032(2003)3514-3520)报道，为了检测细胞表面上的利妥昔单抗，使用特异性检测利妥昔单抗中的小鼠序列并且不与人Ig交叉-反应的抗体。在WO 03/024993中，报道了一种检测和监测治疗用抗体：抗原复合物、可溶的抗原、游离的治疗用抗体和可溶的总治疗用抗体的方法。

本发明的任务是研究检测治疗用抗体在样品中的靶抗原的方法是否可以改进。所述方法应该产生关于靶抗原浓度的真实并且准确的值，而不管相对应的治疗用抗体存在或不存在，并且应该用于连续的检测，例如，在患者随访中。

这一任务已经由如下文和实施例部分所述并且如在后附的权利要求中所要求保护的本发明完成。

发明概述

本发明包括检测治疗用抗体在样品中的靶抗原的方法，所述方法包括下述步骤：

a)提供待分析的样品，

b)在适合所述治疗用抗体与所述靶抗原结合的条件下，将所述样品与所述治疗用抗体温育，由此形成靶抗原-治疗用抗体-复合物，全部靶抗原都被所述治疗用抗体复合，和

c)检测在b)中形成的复合物。

发明详述

在第一个实施方案中，本发明涉及检测在样品中治疗用抗体的靶抗原的方法，所述方法包括下述步骤：a)提供待分析的样品，b)在适合所述治疗用抗体与所述靶抗原结合的条件下，将所述样品与所述治疗用抗体温育，由此形成靶抗原-治疗用抗体-复合物，和c)检测在b)中形成的复合物。