[发明专利]用于治疗和预防子宫颈癌的包含HPV多肽和免疫增强肽的组合物

说明书

技术领域

本发明涉及：一种用于受试者的包括人乳头瘤病毒(HPV)E6和E7融 合多肽、用于使多肽分泌到细胞外面的信号肽和免疫增强肽的融合蛋白； 编码所述融合蛋白的多核苷酸；包含所述多核苷酸的载体；包含所述融合 蛋白或载体的药物组合物；以及使用所述药物组合物治疗由人乳头瘤病毒 引起的疾病的方法。

背景技术

子宫颈癌已成为第二最主要的癌症死亡的原因，全世界每年引起 250,000人死亡。已知子宫颈癌主要由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起(zur Hausen，H et al.Biochem Biophys Acta1996，1288；F55-F78)。在数百种类型 的HPV中，HPV16被认为是子宫颈癌的首要原因(Mark H et al.J Natl Cancer Inst1993，85；958-964)。在HPV蛋白中，E6和E7蛋白在因致癌基 因引起的子宫颈癌的出现中起关键作用，并且已报导它们是在约99％的由 HPV引起的肿瘤中表达的主要蛋白。结果，E6和E7蛋白已成为在治疗和 预防子宫颈癌的疫苗的制备中的主要靶抗原(von Knebel Doeberitz et al.Int. J.Cancer1992，51；831-834)。E6通过诱导肿瘤抑制蛋白p53的分解而阻止 细胞凋亡，而E7与作为细胞肿瘤抑制因子的成视网膜细胞瘤蛋白(Rb)结 合以使该蛋白失活，然后诱导细胞进入细胞周期的S期(Cobrinik et al.， Trends Biochem Sci1992，17：312-5)。

为了治疗子宫颈癌，使用表达核酸碱基序列(同时表达HPV16E6和 E7蛋白)的组合物进行临床试验，但其疗效并不显著(Garcia F et al.Obstet Gynecol2004，103；317-326)。此外，国际专利公开WO2004/030636披露 了一种包括E6和E7的融合多肽(其中E6位于氨基末端或羧基末端)，以 及编码该融合多肽的多核苷酸。然而，该文献中公开的多肽在治疗由HPV 引起的子宫颈癌方面仍具有限制。

因此，本发明人已经发现包括与分泌肽和免疫增强肽结合的 HPVE6/E7融合多肽的融合蛋白促进免疫应答，并有效治疗和预防由HPV 引起的肿瘤，从而完成本发明。

发明内容

技术方案

本发明的一个目的是提供一种非常有效地治疗和预防由HPV引起的 疾病的融合蛋白。

本发明的另一目的是提供编码所述融合蛋白的多核苷酸。

本发明的再一目的是提供包含所述多核苷酸的重组载体。

本发明的还一目的是提供包含所述融合蛋白和重组载体的药物组合 物。

本发明的还一目的是提供在受试者中使用所述药物组合物治疗或预 防由HPV引起的疾病的方法。

附图说明

图1为显示通过在C57BL/6小鼠模型中接种表达Mock、E6^Co、E7^Co、 E67和E67^Co、tE67^Co、tF^CoE67^Co和tE67^CoL^Co的质粒DNA产生的E7特异 性CD8⁺T细胞应答的比较结果的图。

图2为显示通过在C57BL/6小鼠模型中接种Mock、E6^Co、E7^Co、E67 和E67^Co、tE67^Co、tF^CoE67^Co和tE67^CoL^Co产生的E6特异性CD8⁺T细胞应 答的比较结果的图。

图3为显示在用Mock、E6^Co、E7^Co、E67和E67^Co、tE67^Co、tF^CoE67^Co和tE67^CoL^Co接种的C57BL/6小鼠中对皮下注射TC-1肿瘤细胞的预防性抗 肿瘤作用的比较结果的图，，该作用通过肿块体积的增加来指示。