[发明专利]一种中药膜荚黄芪的质量检测方法

权利要求书

1.一种中药膜荚黄芪的质量检测方法，其特征在于步骤和条件如下：

(1)供试样品溶液制备

本发明选择50％-100％(V/V)的乙醇作为溶媒，将中药膜荚黄芪粉碎，过40-60目筛，称取已粉碎的中药膜荚黄芪5-10g于200ml锥形瓶中，加50％-100％(V/V)的乙醇50-100ml，通过超声提取1-3次，20-40min/次，超声提取温度20-60℃；合并上述提取液并浓缩，水定容至10ml容量瓶中，即为样品溶液a，饱和正丁醇萃取样品溶液a 2-4次，20-40ml/次，分别合并各次萃取的正丁醇溶液，减压蒸干，残渣以甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中，摇匀，即为供试样品溶液；

(2)供试样品的电喷雾指纹图谱

供试样品的电喷雾指纹图谱通过如下步骤得到：取5-10μl的供试样品溶液，用甲醇稀释至100-500μl，作电喷雾质谱分析，电喷雾质谱实验条件如下：电喷雾离子源，喷雾电压3.5-5.5kV，毛细管温度180-220℃，流动注入泵进样流速2-8μl/min；扫描范围质荷比(m/z)50-2000，利用正离子模式电喷雾质谱确认皂苷、黄酮的种类；

(3)总皂苷含量测定

总皂苷含量测定的方法：精密称取干燥的黄芪甲苷标准对照品50mg，用无水乙醇溶解并定容至10ml容量瓶中，摇匀，即为黄芪甲苷标准对照品溶液，备用；香草醛配成8％乙醇溶液；硫酸配成72％(V/V)溶液；用移液枪精密移取黄芪甲苷标准对照品溶液0、15、30、45、60、75μl及10μl供试样品溶液分别置于七个10ml具塞试管中，分别加入无水乙醇至2ml，再分别加入0.5ml的8％香草醛乙醇试剂，在冰水浴中加入7.5ml 72％(V/V)硫酸溶液，摇匀，于62℃水浴保温20min，取出，摇匀，作为待测溶液；在30min内，于530-560nm波长处测定待测溶液的吸光度，以黄芪甲苷标准对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标，对应黄芪甲苷标准对照品浓度(C)为横坐标进行线性回归，得到黄芪甲苷标准对照品的标准工作曲线和线性回归方程，然后根据供试样品溶液的吸光度和得到的黄芪甲苷标准对照品的标准工作曲线，测得供试样品中总皂苷的含量；

(4)总黄酮含量测定

总黄酮含量测定：精密称量约10mg的芦丁标准对照品，用60％乙醇溶解并定容至25ml容量瓶中，摇匀，即为芦丁标准对照品溶液，备用；用移液枪精密移取芦丁标准对照品溶液0、20、40、60、80、100μl及25μl供试样品溶液分别置于七个25ml容量瓶中，分别加入5％亚硝酸钠溶液0.2ml，摇匀，静置6min，再分别加入10％硝酸铝溶液0.2ml，摇匀，静置6min，再分别加入4％氢氧化钠溶液1ml，加60％乙醇定容至刻度，摇匀，静置15min，作为待测溶液；于490-510nm波长处测定待测溶液的吸光度，以芦丁标准对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标，对应芦丁标准对照品浓度(C)为横坐标进行线性回归，得到芦丁标准对照品的标准工作曲线和线性回归方程，然后根据供试样品溶液的吸光度和得到的芦丁标准对照品的标准工作曲线，测得供试样品中总黄酮的含量，完成一种中药膜荚黄芪的质量检测方法。