[发明专利]利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法

权利要求书

1.利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于，包括：

A、分离得到菌株；

B、配制M₁培养基，将分离得到的菌株于M₁培养基中培养，控制温度，适度振荡，掌握培养时间；

C、配制M₂培养基，无菌条件下抽滤收集菌丝，菌丝经无菌蒸馏水清洗，置M₂培养基中悬浮备用；

D、将M₂培养基及菌丝接入灭菌后的M₁培养基中培养适当时间，控制温度，适度振荡，即得到生产种。

2.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：所述分离得到菌株的方法可以采用孢子分离，或母代分离，或组织分离。

3.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：所述M₁培养基的配方为蒸馏水0.8～1.2升，马铃薯190～210克，葡萄糖13～17克，磷酸二氢钾0.8～1.2克，硫酸镁0.4～0.6克，蛋白胨2.1～2.3克，PH值6.1～6.3，并且至少在121℃湿热条件下灭菌至少30分钟。

4.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：所述M₂培养基之配方为蒸馏水0.8～1.2升，磷酸二氢钾0.8～1.2克，硫酸镁0.4～0.6克，放线菌酮18～22毫克，PH值6.1～6.3，并且至少在121℃湿热条件下灭菌至少30分钟。

5.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：本方法之B中，菌株于M₁培养基中培养的温度控制在18～22℃为宜。

6.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：本方法之B中，菌株于M₁培养基中培养时，置于振荡频率为100～120转/_分钟的摇床上。

7.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：本方法之B中，菌株于M₁培养基中培养的时间控制在140～150小时。

8.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：所述C中，无菌条件下抽滤收集的菌丝经无菌蒸馏水清洗不得少于三次，确保清洗干净。

9.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：所述D中，按容积1％～2％的比例将M₂培养基及菌丝接入灭菌后的M₁培养基中培养，即该M₂培养基及菌丝是该M₁培养基容积的1％～2％。

10.根据权力要求1所述的利用静息细胞制备蛹虫草生产种的方法，其特征在于：所述D中，将M₂培养基及菌丝接入灭菌后的M₁培养基中培养的时间为140～150小时，摇床的振荡频率为100～120转/_分钟，温度控制在18～22℃为宜。