[发明专利]一种链霉菌抗菌产物及其生产方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种链霉菌抗菌产物及其生产方法，属于生物技术领域。可用于食品防腐剂、化妆品防腐剂、饲料添加剂等。

二、技术背景

近年来，由于药物的滥用、药物残留和细菌耐药性等问题日渐严重，从而引发了人们对食品安全和用药安全的关注。寻找新型的更有效的抗菌物质刻不容缓，成为全世界的研究热点。

在过去的半个多世纪里，人们主要从寒带、温带、热带、火山口和冰川等不同环境的陆地以及不同地域所生长的动物及植物表面开发和获得新型的抗菌物质。但是，随着研究的不断深入和新型有效抗生素需要的迫切性增加，从陆地生物开发新的抗菌物质的机会大大减小，满足不了人们的需要，因此，科学工作者们将眼光投向占地球表面积3/4的资源丰富的海洋。

海洋环境是一个十分独特的生态环境，包罗了高盐、高压、低温(尤其是深海)、低光照、寡营养等特点，还有无光照以及局部高温的极端环境，其中分布着数量极其庞大、种类繁多的微生物。最近美国科学家发现在一些地方，每平方英尺的海泥上能找到十多种尚未能认识的新生物。相对于陆地微生物而言，海洋微生物大部分都是适应了极端环境的极端微生物，它们能够耐受海洋特有的高盐、高压、低营养、低光照等极端条件，代谢途径不同于陆地微生物，可产生完全不同于陆地微生物的新颖生物活性物质。日本海洋生物技术研究所对海洋微生物进行广泛的研究，发现27％种属的海洋微生物具有抗菌活性。目前，已从海洋微生物及海洋动物的共生微生物的代谢产物中分离到许多新的生物活性物质，其中相当一部分是陆地生物所没有的。因此海洋生物资源为新活性物质的开发提供了可能，是一个十分巨大的有待深入开发的生物资源。世界各国和组织纷纷把研究开发的重点转向了前景更为广大的海洋微生物资源，这成为海洋生物技术开发的主要内容。

放线菌目及其相关的微生物是革兰氏阳性菌中形态发生最为多样化的组群，具有代谢多样性并能产生多种生物活性物质，这一特性在微生物界中少有匹敌。目前的天然抗生素大约有三分之二是来自放线菌，因此海洋放线菌是工业微生物中生理性状独特的新资源。在已有的报道中，链霉菌在已知的产抗菌物质的海洋微生物中占的比例最大，这和陆地微生物的情况相似。在防腐剂方面，目前我国食品添加剂标准(GB2760)允许使用的天然防腐剂仅乳链菌肽(Nisin)和纳他霉素(Natamycin)两种，其中Natamycin就来自于放线菌中的纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)，为多烯烃大环内酯化合物，是一种高效真菌抑制剂，能有效杀死霉菌、酵母菌和丝状真菌，但对细菌和病毒无效。在抗生素方面，土霉素、天神霉素、红霉素、泰乐霉素等多种应用多年的医用、农用、兽用抗生素都有从海洋放线菌中找到产生菌株的报道。找到新型抗菌物质的报道则更多。福建海洋研究所的方金瑞教授等从海洋耐盐嗜碱放线菌产生的抗菌物质中分离到一种新型的氨基糖苷类抗生素，称为丁酰苷菌素，它对许多细菌具有强的抑制作用。黄维真等分离到一株海洋放线菌——鲁特格斯链霉菌鼓浪屿亚种(Streptomyces rutgersensis subsp.Gulangyunensis)，能够产生抗菌谱广毒性低的抗菌物质Minobiosamine和肌醇胺霉素等。这些研究表明海洋放线菌成为放线菌代谢产物的重要新来源。

三、发明内容

技术问题

本发明提供一种链霉菌抗菌产物及其生产方法，此抗菌物质具有作为食品防腐剂、化妆品防腐剂、饲料添加剂及药物的潜力。

技术方案

利用弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)GB-2产生的抗菌产物，是通过以下方法获得的：

1)链霉菌GB-2摇瓶种子液制备

取试管斜面链霉菌GB-2菌种接种于装有种子培养基的摇瓶中，28℃180rpm培养48-36h，至对数生长期，制成浓度为10⁷-10⁸cfu/L的摇瓶种子液；种子培养基配方：可溶性淀粉20.0g，黄豆粉15.0g，葡萄糖5.0g，酵母膏2.5g，CaCO₃ 1.0g，人工海水1000mL，pH 7.5。

2)链霉菌GB-2种子罐种子液制备

取摇瓶种子液以体积比10％接种于种子罐中，培养至对数期，获得浓度为10⁷-10⁸cfu/L种子罐种子液，种子罐培养基、培养条件同摇瓶种子培养。

3)链霉菌GB-2抗菌代谢产物发酵