[发明专利]一种测定原料乳中体细胞数的方法

权利要求书

1.一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于测定原料乳体细胞数的方法按如下步骤进行：一、预处理：取待测原料乳两份，分别命名为样品1和样品2，将样品1中的体细胞滤出，得到不含体细胞对照品，分别取等体积样品2和对照品加入透明器皿中，预热至36～38℃；二、反应试剂的加入：分别向样品2和对照品中加入酯溶液、缓冲盐溶液和重氮盐溶液，每1mL的样品2和对照品分别需要加入酯溶液0.01～0.1mL、缓冲盐溶液0.01～0.1mL和重氮盐溶液0.01～0.1mL；三、测定颜色变化：立即用仪器分别采集步骤二加入反应试剂后的样品2和对照品的颜色信息，并记录颜色信息对应的时间，根据颜色变化速度与体细胞数的函数方程计算，即得到原料乳中体细胞数；其中步骤二及步骤三中样品2和对照品温度始终保持36～38℃；步骤二中的酯溶液的浓度为0.02～0.6mol/L；步骤二中的缓冲盐溶液的pH值为7.2～7.6，浓度为0.0025～0.25mol/L；步骤二中的重氮盐溶液的浓度为0.02～0.6mol/L；按照与步骤二完全相同的剂量和浓度向已知体细胞数的原料乳中加入酯溶液、缓冲盐溶液和重氮盐溶液，建立步骤三中的颜色变化速度与体细胞数之间固定的函数关系。

2.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤一中分别将样品2和对照品预热至37℃。

3.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤二中的酯为氯乙酸萘酚酯、吲哚酚酯或吡咯酯。

4.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤二中每1mL的样品2或对照品需要加入0.03～0.07mL的酯溶液。

5.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤二中每1mL的样品2或对照品需要加入0.06mL的缓冲盐溶液。

6.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤二的重氮盐为1，2-重氮氧基萘-4-磺酸或2，4-二氯苯胺重氮盐。

7.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤三中采集样品颜色信息的仪器为颜色传感器、扫描仪、色差仪或反射式光学密度计；其中颜色传感器为电荷耦合器件、电荷注入器件或光敏二极管阵列。

8.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤三中数据的取值和计算的方法为在相隔2～15分钟后再次采集颜色信息，然后用样品2两次的颜色测定差值与对照品两次的颜色测定差值相减，得到体细胞引起颜色变化的差值，根据颜色变化的差值与体细胞数的函数方程计算，即得到原料乳中体细胞数。

9.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤三中数据的取值和计算的方法为每隔0.5～30秒再采集一次颜色信息，连续采集至样品2和对照品颜色差值到达某一数值，记录所需要的时间，根据时间与体细胞数的函数方程计算，即得到原料乳中体细胞数。

10.根据权利要求1所述的一种测定原料乳中体细胞数的方法，其特征在于步骤三中数据的取值和计算的方法为每隔0.5～30秒再采集一次颜色信息，连续采集几分钟，颜色信息用RGB表示，分析RGB值随时间变化斜率，并计算样品2和对照品斜率差值，根据斜率差值与体细胞数的函数方程计算，即得到原料乳中体细胞数。