[发明专利]一种利用光合细菌生产氢气的方法

权利要求书

1.一种利用光合细菌生产氢气的方法，其特征在于该方法包括下 述步骤：

(1)深红红螺菌(Rhodospirillum rubrum)ATCC11170菌种活化： 将该菌种接种于SMN平板培养基上，在温度30℃下培养4-5天；

所述SMN平板培养基的制备方法是按照4g/L苹果酸、1g/L氯化氨、 3g/L酵母浸膏粉、3g/L酶水解酪蛋白、0.25g/L硫酸镁、10mL 10％氯化 钙水溶液、10mL微量元素溶液称取组分，然后用蒸馏水溶解，用无机碱 将其溶液pH调节到6.8，再加入10mL 2mol/L磷酸盐缓冲液，用蒸馏水 定容到1000mL，在该液体培养基中加入1.2％w/v的琼脂；

(2)所述菌种的种子培养：将步骤(1)得到的活化R.rubrum菌种接 种于30-40ml SMN液体培养基中，在温度30-32℃与振荡速度90-110rpm 的条件下进行避光振荡培养20-24小时；

所述SMN液体培养基的制备方法是按照4g/L苹果酸、1g/L氯化氨、 3g/L酵母浸膏粉、3g/L酶水解酪蛋白、0.25g/L硫酸镁、10mL 10重量％ 氯化钙水溶液、10mL微量元素溶液称取组分，然后用蒸馏水溶解，用无 机碱将其溶液pH调节到6.8，再加入10mL 2mol/L磷酸盐缓冲液，最后 用蒸馏水定容到1000mL，然后在温度121℃下进行灭菌30min；

(3)所述培养菌种的发酵培养：按4-8％v/v接种量将步骤(2)得 到的种子培养液接入在厌氧管中的MG培养基里，接种后厌氧管顶部留 有空间，以避免产生氢气后使该系统的压力骤然增高；

所述MG培养基的制备方法是按照4g/L苹果酸、1.33g/L谷氨酸钠、 0.25g/L硫酸镁、10mL 10％氯化钙溶液、10mL 2mol/L磷酸缓冲液、10mL 微量元素溶液称取各个组分，然后用蒸馏水溶解，用无机碱将其溶液pH 调节到6.8，再用蒸馏水定容到1000mL，在121℃下进行灭菌30min；

在光照培养室中将上述步骤得到的接种培养液置于自然光经青蓝色 玻璃滤光后的光下，在厌氧管表面的光照强度为20000-30000lux与培养 温度为28-32℃的条件下进行培养6-48小时，然后置于自然光下在厌氧 管表面光照强度为20000-30000lux与培养温度为28-32℃的条件下进行 培养；

(4)收集氢气，直到停止产生氢气。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的青蓝色玻璃具有 下述特征：青蓝色玻璃厚度为0.3mm，透过波长范围为365-650nm，最 高透光率为90％，在365nm和650nm处透光率为50％。