[发明专利]真菌细胞壁中脱乙酰壳多糖的制备方法无效
申请号: | 200910045923.8 | 申请日: | 2009-01-22 |
公开(公告)号: | CN101481718A | 公开(公告)日: | 2009-07-15 |
发明(设计)人: | 张利涛;徐君;张杰;常东亮 | 申请(专利权)人: | 中国科学院嘉兴应用化学工程中心 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C12R1/645 |
代理公司: | 上海开祺知识产权代理有限公司 | 代理人: | 费开逵 |
地址: | 314006浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 真菌 细胞壁 乙酰 多糖 制备 方法 | ||
1.一种真菌细胞壁中脱乙酰壳多糖的制备方法,包括以下步骤:
(1):将Actinomucor taiwanensis类真菌菌株进行划板、摇瓶培养、发酵罐培养,得到的菌液经离心获得湿菌体;
(2):从菌丝体中分离并提取出脱乙酰壳多糖。
2.根据权利要求1所述的脱乙酰壳多糖的制备方法,其特征在于,步骤(1)中的划板培养所用的培养基为PDA培养基,其组成为:土豆300g/L,葡萄糖20g/L,琼脂15g/L。
3.根据权利要求1所述的脱乙酰壳多糖的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的的摇瓶培养所用的基础培养基为E2培养基,其组成为NaNH4HPO4·4H2O:3.5g/L;K2HPO4·3H2O:7.5g/L;KH2PO4:3.7g/L;MgSO4:0.12g/L;碳源:碳含量20g/L;所述碳源包括葡萄糖、牛肉浸膏、酵母浸膏;摇瓶培养在E2的基础上添加0.56g/L的CaCl2,0~5g/L的蛋白胨。
4.根据权利要求1所述的脱乙酰壳多糖的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的发酵罐培养所采用的发酵培养基的初始pH值为3~8;其成分包括20~200g/L碳源、10~80g/L氮源、1.0~20g/L酵母浸膏、0.01~40g/L的MgSO4、0~5.6g/L的CaCl2,所述的碳源包括葡萄糖、牛肉浸膏;氮源包括蛋白胨、NaNH4HPO4·4H2O、氮水。
5.根据权利要求1所述的脱乙酰壳多糖的制备方法,其特征在于,步骤(2)分离出菌丝体后滤干,于110~130℃、1~2N NaOH处理细胞15~30分钟,离心沉淀固体物并用蒸馏水和乙醇洗涤,烘干并碾碎固体;用1~4%的盐酸溶液处理洗涤的沉淀物,使其pH值在5.0至6.5之间,并于90~100℃保温10~14小时,离心分离,产生酸性上清液和酸不溶性沉淀物;用2N NaOH将上清液调节到pH值10以上,从而沉淀出絮状脱乙酰壳多糖,离心,冷冻干燥,得产品。
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