[发明专利]一种检测TB抗体的磁性免疫层析试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明是涉及医学检验领域的一种检测TB抗体的磁性免疫层析试纸条及其制备方法。

背景技术

结核(Tuberculosis，TB)是常见并可致命的一种传染病，由分枝杆菌(主要是结核分枝杆菌[Mycobacterium tuberculosis]，又称「结核杆菌」[tubercle bacillus])导致。结核通常感染并破坏肺(称「肺结核」，又称「肺痨」)以及淋巴系统(称「结核性淋巴病变」，又称「淋巴结核」)，但其它器官如脑、中枢神经系统、循环系统、泌尿系统、骨骼、关节、甚至皮肤亦可受感染(如感染脑部可引致「结核性脑膜炎」)。其它的分枝杆菌，如牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)、非洲分枝杆菌(Mycobacteriumafricanum)、卡氏分枝杆菌(Mycobacterium canetti)、田鼠分枝杆菌(Mycobacteriummicroti)亦可引起结核，但通常不感染健康成人。

全球现有6亿人，即全球人口的十分之一，感染有结核杆菌。大多数的受感染者没有病症，称为潜伏结核感染(latent TB infection)，但其中约5-10％的潜伏感染者会发展至活动性结核；若无适当治疗，一个活动病例平均每年可使10-15人新受感染，病例本人的死亡率则超过50％。若潜伏感染者同时罹患免疫抑制，如艾滋病，每年就有10％的病发机率。2005年全球有880万新发结核病例，160万结核死亡病例。大多数结核病例在发展中国家，其中非洲的人均发病率最高，在28％；但半数以上的病例在6个亚洲国家：印度、中国、印度尼西亚、孟加拉国、巴基斯坦、菲律宾，在撒哈拉以南非洲及某些已发展国家，患结核病的人数有上升趋势，因为不少人的免疫系统因抑制免疫力药物、物质滥用或艾滋病而受损。

艾滋病的蔓延及忽视结核病控制工作令结核病再次成为一种主要的传染病。此外，多抗药性结核及广泛抗药性结核正在蔓延。世界卫生组织在1993年宣布结核病是一件全球健康紧急事件，因此结核病的诊断治疗成为一件刻不容缓的事情为各国政府所重视。

目前结核病的诊断可以依据临床表现与X光，也可以参考结核菌素试验、组织病理切片、耐酸性染色、结核菌培养及MTB PCR。血清学方面，酶联免疫试验(ELISA)，化学发光(CLIA)，免疫层析法(胶体金或乳胶颗粒法)，这些方法都有各自的特点和使用对象。临床表现及X光检测以及结核菌素实验，组织病理切片等等方法结果准确可靠，可作为结核病诊断的金标准，但却只适合于结核病患者，不适合初发感染未见症状者。

血清学检测则能早期检测无症状感染者，但是ELISA试验操作程序复杂，容易出现假阳性或假阴性结果，且灵敏度低，CLIA与ELISA方法类似，只是灵敏度提高了一些，并没有根本解决ELISA存在的问题，并且二者都存在操作繁琐，反应时间长的问题，而且都需要酶标仪或发光仪和洗板机以及温箱等复杂设备，而且不能单人份检测，进一步限制了他们在一些基层医院、诊所的应用。近几年国内外出现了以胶体金或乳胶颗粒为代表的快速检测试纸条，但是由于结果是肉眼目视观察，容易受观察者主观判断的影响，灵敏度低，结果准确度不高。

磁性免疫层析(Mgnetic ImmunoChromatographic Test，MICT)是近年来出现的的一种新一代单人份快速定量检测技术。是以超顺磁性颗粒(superPMPs)代替传统的标记物(胶体金，乳胶颗粒等)来进行免疫层析，通过检测结合在超顺磁性纳米微粒上的生化物质来提供对生物样品的定量检测数据。通过检测测量磁场强度来表达标记在样品区域的量，采用标记的免疫复合物-磁场强度的标准曲线，从而达到定量的目的。该技术与传统技术相比具有下述优势：1)分析灵敏度：比各类目测快速诊断法灵敏10-100倍；2)分析速度：可在15秒内测量到多达6个分析位点的数据；3)线形范围：在1-104的浓度范围内呈线性；4)所用磁性检测仪器采用固相元件，微型化设计自成一体，独立运行，体积小，操作简便；5)超顺磁性纳米微粒由聚合物包被，不会随时间而衰变；独立的快速诊断色谱卡(MAR Cassette)可直接插入MAR检测仪，为目前许多快速临床诊断试剂的整合提供了广泛的开发空间；而且还避免了操作过程中人员或仪器可能发生的交叉污染，提高了分析和过程的安全性。该技术继承了传统免疫层析法(胶体金，乳胶颗粒等)简便快速，单人份操作的优点，又弥补了传统免疫层析技术灵敏度低，只能定性，不能定量的缺点，代表了当今即时检验(Point of Care Test，POCT)技术发展的方向和潮流，一经问世，发展迅速，目前已经成为替代传统免疫层析技术的首选。