[实用新型]克伦特罗ELISA检测试剂盒

说明书

（一）技术领域：

本实用新型涉及检测克伦特罗残留量的试剂盒，特别是检测动物组织、尿液、饲料等样本中克伦特罗残留量的酶联免疫试剂盒。

（二）背景技术：

克伦特罗(Clenbuterol)属于β-兴奋剂。近年来被非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长，因其添加剂量是治疗剂量的5-10倍，以至于在动物体内残留量高而给消费者带来危害。

目前国内外有关食品中克伦特罗检测方法大都采用高效液相色谱法、液相色谱-质谱法和气相色谱-质谱法的等进行检测，但上述几种检测方法所使用的设备价格昂贵，检测过程繁琐，不适合现场监控和大量样本筛查。

（三）实用新型内容：

本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的克伦特罗残留量检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，需要的技术含量不高，可进行一次连续多个样品中克伦特罗含量的测定，减少了检测样本所需要的时间。

本实用新型的技术方案是：一种检测动物源性食品中克伦特罗残留量的酶联免疫试剂盒，包括盒体和盒内的一块96孔的酶标板、一张盖板膜、13瓶试剂和放试剂的15个下凹瓶位、一个自封袋、一份说明书和一份质检报告，其特征在于：采用96孔聚苯乙烯试剂板作为固相载体，酶标板由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔，在试剂盒酶标板微孔条上预包被克伦特罗偶联抗原制成检测板，放入真空铝箔袋中，盒体为硬纸盒，下凹瓶位由塑料泡沫制成，以塑料硬膜为盖板膜，盖板膜大小与酶标板横切面大小一致，将13瓶试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶和玻璃瓶盛装并固定在下凹瓶位中与酶标板、盖板膜、自封袋、说明书、质控报告一同封装在硬纸盒内，以便于携带和运输。13瓶试剂分别为6瓶1ml梯度浓度的标准品溶液，浓度分别为0μg/L、0.1μg/L、0.3μg/L，2.7μg/L、8.1μg/L、1ml高浓度标准品溶液、7ml酶标二抗、10ml克伦特罗抗体工作液、7ml显色液A液、7ml显色液B液、7ml终止液、40ml浓缩洗涤液。每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔)，既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。将剩下的放回铝箔袋中用自封袋密封，这样可以保证试剂盒检测结果的准确性。检测时，样本中的克伦特罗将和酶标板微孔条上预包被的克伦特罗偶联抗原竞争抗克伦特罗抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光度值与样本中所含克伦特罗的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中克伦特罗的含量，其操作简便易行。

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：尿液样本的最低检测限为0.1μg/L；饲料样本的最低检测限为10μg/kg；低脂肪肌肉、肝脏组织样本处理方法(a)的最低检测限为0.1μg/kg；低脂肪肌肉、肝脏组织样本处理方法(b)的最低检测限为0.4μg/kg；高脂肪肌肉组织的最低检测限为0.1μg/kg。尿液样本的回收率为90％±15％；饲料样本的回收率为95％±15％；组织样本的回收率为70％±10％；相对于其他克伦特罗检测方法，本试剂盒所需仪器较少，只需要酶标仪、氮气吹干装置、均质器、涡旋仪、离心机、振荡机和微量加样器，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于克伦特罗残留量的检测。

(四)附图说明：

图1为本实用新型酶联板的侧面纵剖面图(长为8.55cm)；

图2为本实用新型酶联板的侧面横剖面图(长为12.8cm)；

图3为本实用新型酶联板的俯视图；

图4为本实用新型盖板膜平面图；

图5为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图；

图6为本实用新型固定泡沫模具的俯视图；