[发明专利]兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗体及其制备方法

权利要求书

1.一种MARVELD1多肽，其特征在于，氨基酸序列为： ProProProArgGlnProProProGlnAlaArgAlaAlaArgCys。

2.一种兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗体的制备方法，其特征在于：步骤 如下：

步骤一：经DNAStar软件分析后，确定MARVELD1蛋白N末端4-17位14个 氨基酸作为其抗原表位，并在肽链羧基末端添加一个半胱氨酸，形成的MARVELD1 多肽的氨基酸序列为：

ProProProArgGlnProProProGlnAlaArgAlaAlaArgCys；

步骤二：用多肽自动合成仪合成MARVELD1多肽，纯化后与载体蛋白KLH偶 联，形成MARVELD1多肽-KLH复合蛋白；

步骤三：将乳化后的MARVELD1多肽-KLH在兔背部皮下注射，共进行四次免 疫；

步骤四：收集、分离得到含有兔抗人MARVELD1多肽抗体的血清；

步骤五：将MARVELD1多肽与溴化氰活化的Sepharose 4B偶联，制备多肽亲 和层析柱；

步骤六：将含有兔抗人MARVELD1多肽抗体的血清加入到步骤五制备的层析 柱中，放置于4℃孵育过夜后，洗脱抗体，即得到抗人MARVELD1多肽抗体。

3.根据权利要求2所述的兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗体的制备方法，其 特征在于：所述的MARVELD1多肽的纯化，采用HPLC对其进行纯化，使MARVELD1 多肽的纯度达到95％以上。

4.根据权利要求2所述的兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗体的制备方法，其 特征在于：所述的免疫次数为四次。

5.根据权利要求2所述的兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗体的制备方法，其 特征在于：步骤六采用免疫亲和纯化的方式对兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗体 进行纯化。