[发明专利]可可脂改良剂的生物合成

说明书

技术领域

酶促酯交换法制备CBI的方法，属于专用油脂的开发。

背景技术

可可脂是从可可豆制得的食用油脂，具有入口即化的特点，是食品工业中生产巧克力的重要原料。不同产地下，可可脂中的POP、POS、SOS相对比例可能不同，加入适当的CBI可使这种自然差异大大降低；牛奶巧克力由于含较高的乳脂会使产品严重变软，加入CBI可增加高乳脂体系巧克力制品的硬度，且具有抗起霜作用；热带地区、夏天高温地区，加入CBI提高固脂含量，可以增强耐热性。

国内外文献已大量报道脂肪酶应用于制备CBE的研究。Vimon Seriburi等酶促OOO和SSS酯交换制备CBE，最佳产率为OSS和SSO总量46.6％，而SOS只有0.2％。Thomas Gitlesen等用Rhizopus arrhizus脂肪酶催化高油酸的菜籽油和硬脂酸乙酯合成SOSt型结构的甘三酯，产品中SOS 36％、SSO(OSS)含量27％。Ozan Nazim等用1，3-特异性脂肪酶酸解橄榄油和棕榈酸、硬脂酸合成CBE，产品中POP、POS、SOS含量分别为11％、21.8％、15.7％。

目前，国内外研究只是针对于CBE，而非针对CBI。未见详实报道高SOS含量，同时控制酰基转移，使SSO含量控制较低值的研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种高油酸植物油、硬脂酸酯交换制备CBI的方法。

技术方案：以高油酸植物油与硬脂酸(或其低级醇酯)为原料进行酯交换反应，得到的混合物经过分子蒸馏脱除脂肪酸，再分提纯化得到产品CBI。首先采用1，3-特异性脂肪酶作为催化剂，进行酯交换反应，以SOS含量高而1，2-二硬脂酸-3-油酸甘油酯(SSO)和三硬脂酸甘油酯(SSS)含量较为佳，优化酯交换反应条件；对优化的产物，经过分子蒸馏脱除脂肪酸，以重相得率和酸价为指标进行优化；对脱酸产物，采用丙酮、正己烷等溶剂进行湿法分提，以富含SOS的硬脂得率为指标，优化分提条件。

一、原料的酯交换反应

将高油酸植物油/硬脂酸以摩尔比为1∶1～ 1∶6得到各种配比的混合物，反应体系加水量0～5％(以底物重量计)，酶添加量4～14％(以底物重量计)，分别在温度55～85℃下反应1～6h。在上述反应条件下进行试验，然后将反应产物用热正己烷溶解，趁热过滤除去酶。旋转蒸发除去正己烷后备用。

甘三酯SOS、SSO和SSS的含量的测定：采用高效液相法(HPLC)对酯交换底物及反应产物的甘油三酯组成进行分离，采用AOCS Ce 5c-93(内部归一化法)定量。综合考虑，在反应温度60～80℃，酶用量8～12％(以底物重量计)，反应时间3～6h时，SOS含量较高，并能控制由于酰基转移产生的SSO和SSS的含量较低。

二、分子蒸馏脱酸

将酯交换后产物分别在预热温度70～90℃，进料速率1～5mL/min，加热温度170～210℃，刮板转速50～200r/min下进行试验。测重相的得率和酸价(按GB5530-85《植物油脂检验酸价测定法》执行)。

三、分提纯化

脱酸产物/丙酮1∶1～1∶3(w/v)混合物，在50℃下溶解完全，慢慢降温，结晶除去甘二酯，然后分别在结晶温度5～25℃，养晶时间2～5h下进行试验。会结晶出部分晶体，分离得到硬脂和软脂组分。组分中的溶剂在真空下除去。测富含SOS的硬脂得率。

本发明的有益效果：

酶促酯交换法制备CBI的方法，属于专用油脂的开发。

可可脂是从可可豆制得的食用油脂，具有入口即化的特点，是食品工业中生产巧克力的重要原料。不同产地下，可可脂中的POP、POS、SOS相对比例可能不同，加入适当的CBI可使这种自然差异大大降低；牛奶巧克力由于含较高的乳脂会使产品严重变软，加入CBI可增加高乳脂体系巧克力制品的硬度，且具有抗起霜作用；热带地区、夏天高温地区，加入CBI提高固脂含量，可以增强耐热性。

附图说明

图1RP-HPLC上的甘三酯分离效果图

图2Ag⁺-HPLC上SOS与SSO分离效果图

具体实施方式

实施例1.原料的酯交换反应

准确称取高油酸植物油/硬脂酸摩尔比为1∶4的混合物，在加水量1％、加酶量10％、70℃下反应4h。反应产物中的主要甘三酯组成如表1所示。

表1反应产物中主要甘三酯组成

实施例2.分子蒸馏脱酸