[发明专利]SET基因RNA干扰重组载体及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种SET基因RNA干扰重组载体，其特征是：包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列，所述的可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列正向插入表达载体的多克隆位点序列内；所述可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列依据SET mRNA靶序列设计；所述表达载体为psiRNA-hH1 neo。

2.如权利要求1所述的SET基因RNA干扰重组载体，其特征是：所述的多克隆位点包Bbs I限制性酶切位点，所述寡核苷酸链包括Sense+Loop+Antisense，并在两端加上Bbs I限制性酶切位点；所述的Loop为TCAAGAG。

3.如权利要求2所述的SET基因RNA干扰重组载体，其特征是：所述的SET mRNA靶序列为5′-AACAGCAAGAAGCGATTGAAC-3′(SQE ID No 1)；所述的寡核苷酸链模板序列包括寡核苷酸正义链序列和寡核苷酸反义链序列，所述正义链序列为：

5′-TCCCAACAGCAAGAAGCGATTGAACTCAAGAGGTTCAATCGCTTCTTGCTGTTTT-3′(SQE ID No 3)；

所述反义链序列为：

5′-CAAAAAACAGCAAGAAGCGATTGAACACTCTTGATGTTCAATCGCTTCTTGCTGT-3′(SQE ID No 4)。

4.如权利要求2所述的SET基因RNA干扰重组载体，其特征是：所述的SET mRNA靶序列为5′-AAACGCAGAATAAAGCCAGCA-3′(SQE ID No 2)；所述的寡核苷酸链模板序列包括寡核苷酸正义链序列和寡核苷酸反义链序列，所述正义链序列为：

5′-TCCCAAACGCAGAATAAAGCCAGCATCAAGAGTGCTGGCTTTATTCTGCGTTTTT-3′(SQE ID No 5)；

所述反义链序列为：

5′-CAAAAAAAACGCAGAATAAAGCCAGCACTCTTGATGCTGGCTTTATTCTGCGTTT-3′(SQE ID No 6)。

5.一种构建权利要求1-4任一项所述SET基因RNA干扰重组载体的方法，包括步骤：

(A)依据Genbank的SET基因序列，根据shRNA设计原则选取SET mRNA靶序列，并设计合成可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列；

(B)将设计合成的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列正向插入表达载体的多克隆位点序列内，构建特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体。

6.权利要求1-4任一项所述的SET基因RNA干扰重组载体在制备治疗SET蛋白表达异常相关疾病的药物中的应用。