[发明专利]苔藓表达促进区域

权利要求书

1.编码野生型细胞核来源的苔藓表达促进区域(MEPR)的分离的核酸分子。

2.根据权利要求1的分离的核酸分子，其特征在于MEPR选自立碗藓属(Physcomitrella)、葫芦藓属(Funaria)、泥炭藓属(Sphagnum)、角齿藓属(Ceratodon)、地钱属(Marchantia)以及Sphaerocarpos的MEPR，优选地选自小立碗藓(Physcomitrella patens)、葫芦藓(Funaria hygrometrica)和地钱(Marchantia polymorpha)的MEPR。

3.根据权利要求1或者2的分离的核酸分子，其特征在于MEPR选自序列编号1到27的序列或者其表达促进片段。

4.根据权利要求1到3中任何一项的分离的核酸分子，其特征在于它包含苔藓启动子以及优选地，5′UTR区域和/或5′内含子和/或3′UTR。

5.根据权利要求1到4中任何一项的分离的核酸分子，其特征在于MEPR具有的表达促进活性至少与花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子的表达促进活性相等。

6.根据权利要求1到5中任何一项的分离的核酸分子，其特征在于MEPR具有的表达促进活性至少是花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子表达促进活性的200％，优选至少是500％，特别至少是1000％。

7.根据权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子，其特征在于它还包含重组多肽产物的编码区，所述的编码区在MEPR的控制下。

8.根据权利要求1到7中任何一项的分离的核酸分子，其特征在于它还包含选择标记。

9.根据权利要求1到7中任何一项的分离的核酸分子，其特征在于它还包含与将要用其转化的物种的基因组序列同源的序列，以使在该物种中靶向整合。

10.根据权利要求1到5中任何一项的分离的核酸分子，其特征在于核酸分子以反义或者核酶分子的形式提供。

11.在真核宿主细胞中表达重组多肽产物的方法，包括以下的步骤：提供重组DNA克隆载体，该载体包含根据权利要求1到10中任何一项的编码MEPR的分离的核酸分子，以及选择性地包含所述重组多肽产物的编码区域，所述的编码序列在所述的宿主中，在所述核酸分子的MEPR控制下；转化所述的真核宿主细胞，该细胞在天然情况下不含有在所述的MEPR控制下的所述编码序列；在适宜的培养基中培养转化的真核宿主细胞；表达所述的重组多肽以及分离表达的重组多肽。

12.根据权利要求11的方法，其特征在于所述的真核宿主细胞选自植物细胞，优选是苔藓细胞，特别是小立碗藓细胞。

13.根据权利要求11或者12的方法，其特征在于所述的宿主细胞是原丝体苔藓组织细胞。

14.根据权利要求11到13中任何一项的方法，其特征在于培养基不含有向其中添加的植物激素。

15.根据权利要求11到14中任何一项的方法，其特征在于细胞选自来自立碗藓属、葫芦藓属、泥炭藓属、角齿藓属、地钱属以及Sphaerocarpos的苔藓细胞。

16.根据权利要求11到15中任何一项的方法，其特征在于宿主细胞瞬时表达所述的重组多肽产物。

17.根据权利要求1到10中任何一项的编码MEPR的分离的核酸分子的用途，用于在工业上制备多肽，特别是用于提供制备所述多肽的重组细胞。

18.根据权利要求1到10中任何一项的编码MEPR的分离的核酸分子的用途，用于表达苔藓多肽，所述苔藓多肽的表达在天然情况下不由所述的MEPR控制，特别用于提供表达所述多肽的重组苔藓细胞。

19.根据权利要求1到10中任何一项的编码MEPR的分离的核酸分子的用途，用于筛选和确定表达促进区域的共有序列。

20.根据权利要求1到10中任何一项的编码MEPR的分离的核酸分子的用途，用于重组表达翻译后修饰蛋白，特别是制备翻译后被修饰的蛋白。

21.根据权利要求1到10中任何一项的编码MEPR的分离的核酸分子的用途，用于体外表达重组蛋白。

22.根据权利要求1到10中任何一项的编码MEPR的分离的核酸分子的用途，用于重组表达代谢修饰蛋白。