[发明专利]11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法有效
申请号: | 201010570203.6 | 申请日: | 2010-12-02 |
公开(公告)号: | CN102061320A | 公开(公告)日: | 2011-05-18 |
发明(设计)人: | 王建;李龙;应明华;朱秀燕 | 申请(专利权)人: | 浙江仙琚制药股份有限公司 |
主分类号: | C12P15/00 | 分类号: | C12P15/00 |
代理公司: | 台州市南方商标专利事务所(普通合伙) 33225 | 代理人: | 白家驹 |
地址: | 317300 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 11 17 羟基 雄甾 20 制备 方法 | ||
1.一种11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:利用微生物,将17α-羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮转化为11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮;包括以下步骤:
第一步,配置并处理培养基;
将配置好的培养基于120℃灭菌30分钟;然后冷却到菌种的工艺温度后接种,接种时的空气流量为4Lpm,搅拌速度为165rpm,在工艺温度下培养24小时;当菌丝生长正常,没有染菌,培养基中的菌丝量达到湿重60g/L,即达到投料条件可以投料;
第二步,投料;
用有机溶剂作为溶媒将底物17α-羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮溶解,使之溶清后再投入到培养基中,在培养基中发酵48小时;
或者将底物17α-羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮进行气流粉碎之后直接投料,在培养基中发酵48小时;
第三步,提取菌丝;
发酵结束后收集菌丝,用有机溶剂充分提取菌丝;
第四步,精制;
将提取液浓缩干得产物粗品,再进行精制。
2.根据权利要求1所述的11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:所述微生物为黑根霉、绿僵菌、赭曲霉、白僵菌、新月弯孢霉、或蓝色梨头霉。
3.根据权利要求1所述的11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:所述第一步所用的培养基的配置比例为,包括含氮物质、无机盐、水、2~3%葡萄糖、2~3%玉米浆、0.1~0.2%(NH4)2SO4。
4.根据权利要求3所述的11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:所述含氮物质中添加有蛋白胨、酵母提取物、酵母膏、牛肉膏中的一种或几种。
5.根据权利要求3所述的11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:所述无机盐中添加有KH2PO4、K2HPO4、KCl、KNO3中的一种或几种;添加量为0.05~0.15%。
6.根据权利要求1所述的11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:所述第一步中菌种的工艺温度分别为:黑根霉26±1℃、绿僵菌28±1℃、赭曲霉30±1℃、白僵菌28±1℃、新月弯孢霉29±1℃、蓝色梨头霉28±1℃。
7.根据权利要求1所述的11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:所述第二步中所用的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、二甲基甲酰胺中的一种;所用的有机溶剂的用量为2%~3%。
8.根据权利要求1所述的11α,17α-二羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的制备方法,其特征在于:所述第二步中所用的底物17α-羟基-雄甾-4-烯-3,20-二酮的投料浓度为0.50~1.50%。
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