[发明专利]11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种甾族化合物，具体涉及一种11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮的制备方法。

背景技术

11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮（中间体B）是甾族化合物中一个非常重要的中间体，以它作为原料可以制备多种皮质激素，特别是将来以植物甾醇为起始原料的甾体激素生产领域，它更是多种皮质激素生产工艺中的必经中间体。这些皮质激素可以治疗人类的多种疾病，对保障人们的身体健康有着非常重要的意义。

中间体B的化学式如下：

中间体B可以由17α-羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮（中间体A）转化而成，中间体A的化学式如下：

将中间体A转化为中间体B的反应式如下所示：

目前，用微生物将中间体A转化为中间体B的方法，世界范围报道很少。半个多世纪前，Alejandro Zaffaroni等人用小克银汉霉（Cunninghamella echinulata）将A转化为B，但产物B的收率只有20%左右（见美国专利US2812286）。直到1987年有报道用黑根霉（Rhizopus nigricans）来制备B，但收率更低，只有17%左右，且同时会产生两个分别约3%的副产物（J. steroid Biochem. Vol. 28，No. 2，pp.197-201，1987）。因此，无法实现由A制备B的工业化生产。

此外，现有的甾体激素类药物的工业化生产的起始原料基本上是薯蓣皂素，由于成本原因，该工艺体系中基本上不出现B这一中间体。随着环保要求的提高和其他技术的突破，甾体激素类药物的工业化生产的起始原料开始慢慢地由薯蓣皂素向植物甾醇过渡，这使得甾体激素类药物的工业化生产的成本大大降低。而用植物甾醇生产甾体激素类药物，则B是其中的许多种药物生产工艺中的必经中间体。正因为如此，开发由A制备B的工业化生产技术，意义非常重大。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮的制备方法，它可以提高11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮的转化率。

为解决上述技术问题，本发明11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮的制备方法的技术解决方案为：

利用微生物，将17α-羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮转化为11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮；所述微生物为黑根霉、绿僵菌、赭曲霉、白僵菌、新月弯孢霉、或蓝色梨头霉；包括以下步骤：

第一步，配置并处理培养基；

将配置好的培养基于120℃灭菌30分钟；然后冷却到菌种的工艺温度后接种，接种时的空气流量为4Lpm，搅拌速度为165rpm，在工艺温度下培养24小时；当菌丝生长正常，没有染菌，培养基中的菌丝量达到湿重60g/L，即达到投料条件可以投料；

所用的培养基的配置比例为，包括含氮物质、无机盐、水、2～3%葡萄糖、2～3%玉米浆、0.1～0.2%（NH₄）₂SO₄。

所述含氮物质中添加有蛋白胨、酵母提取物、酵母膏、牛肉膏中的一种或几种。

所述无机盐中添加有KH₂PO₄、K₂HPO₄、KCl、KNO₃中的一种或几种；添加量为0.05～0.15%。

菌种的工艺温度分别为：黑根霉26±1℃、绿僵菌28±1℃、赭曲霉30±1℃、白僵菌28±1℃、新月弯孢霉29±1℃、蓝色梨头霉28±1℃。

第二步，投料；

用有机溶剂作为溶媒将底物17α-羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮溶解，使之溶清后再投入到培养基中，在培养基中发酵48小时；

或者将底物17α-羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮进行气流粉碎之后直接投料，在培养基中发酵48小时；

所用的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、二甲基甲酰胺中的一种；所用的有机溶剂的用量为2%～3%。

所用的底物17α-羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮的投料浓度为0.50～1.50%。

第三步，提取菌丝；

发酵结束后收集菌丝，用有机溶剂充分提取菌丝；

第四步，精制；

将提取液浓缩干得产物粗品，再进行精制。

本发明可以达到的技术效果是：