[发明专利]编码β-葡萄糖苷酶的基因及重组表达载体及重组酿酒酵母表达菌株及应用

权利要求书

1.一种编码β-葡萄糖苷酶的基因，其特征是它具有序列表SEQ ID No.1所述2913个核苷酸序列中的第1位到第2828位的核苷酸序列。

2.一种含有权利要求1所述基因的重组表达盒，其特征是由启动子、分泌肽编码序列、基因外显子序列和终止子组成或由启动子、分泌肽编码序列、基因外显子序列、锚定肽编码序列和终止子组成；所述启动子为序列表SEQ ID No.2所示的酿酒酵母磷酸丙糖异构酶TPI基因启动子Ptpi，所述分泌肽编码序列为序列表SEQ ID No.3所示的瑞氏木霉木聚糖酶II分泌肽编码核苷酸序列xyn2S，所述基因外显子序列是权利要求1所述编码β-葡萄糖苷酶的基因序列中去除5个内含子后的2526个核苷酸序列组成，所述5个内含子分别是对应SEQ ID No.1所述核苷酸序列中第144位到第195位、第241位到第298位、第352位到第412位、第1603位到第1682位和第2543位到2593位的核苷酸序列，所述锚定肽编码序列为序列表SEQ ID No.4所述的酿酒酵母细胞壁2蛋白基因cwp2 3’端207个核苷酸序列，所述终止子为序列表SEQ ID No.5所述的酿酒酵母乙醇脱氢酶ADHⅠ基因终止子TadhⅠ。

3.一种含有权利要求2的重组表达盒的重组表达载体，其特征是用下述方法构建：

将载体YEplac195用PstI和SmaI双切，得到5220bp片段，再用PstI和ScaI双切权利要求2的重组表达盒，进行连接，转化大肠杆菌Top10感受态细胞后得到重组表达载体；或将载体YCplac33用PstI和SmaI双切，得到5582bp片段，再用PstI和ScaI双切权利要求2的重组表达盒，进行连接，转化大肠杆菌Top10感受态细胞后得到第二种重组表达载体。

4.一种含有权利要求2的重组表达盒的重组表达载体的构建方法，其特征是包括如下步骤：将载体YEplac195用PstI和SmaI双切，得到5220bp片段，再用PstI和ScaI双切权利要求2的重组表达盒，进行连接，转化大肠杆菌Top10感受态细胞后得到重组表达载体；或将载体YCplac33用PstI和SmaI双切，得到5582bp片段，再用PstI和ScaI双切权利要求2的重组表达盒，进行连接，转化大肠杆菌Top10感受态细胞后得到第二种重组表达载体。

5.一种含有权利要求3所述重组表达载体的重组酿酒酵母表达菌株。

6.权利要求5所述的重组酿酒酵母表达菌株在能源、医药、食品或化工领域中的应用。