[发明专利]一种富锗蛹虫草菌丝体的培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种富锗蛹虫草菌丝体的培养方法，属于生药学技术领域。

背景技术

蛹虫草(Cordyceps militaris(L.)Link)又称为北虫草、北冬虫夏草、蛹草，隶属于真菌界(Fungi)、子囊菌门(Ascomycota)、盘菌亚门(Pezizomycotina)、粪壳菌纲(Sordarimycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、麦角菌科(Clavicipiaceae)、虫草属[Cordyceps(Fr.)Link]，是虫草属真菌的模式种。蛹虫草在世界各地均有分布，是一种虫生真菌，也是药用真菌中的一种，该真菌侵染寄主昆虫的幼虫、成虫或蛹，使其僵化，在一定条件下，该僵虫形成具有虫(僵虫菌核)、草(真菌子座)复合形态的真菌结构。现代研究表明：蛹虫草含有虫草素、虫草酸、虫草多糖、核苷、甾醇等多种生物活性物质；对人体具有多种显著的生理功能，具有增强免疫力、调节内分泌、抗疲劳、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗肿瘤、抗缺氧、镇静、降血糖、保护肝肾及呼吸系统等多种生理功能。其活性成分和功能与著名的药用真菌冬虫夏草〔Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc〕极其相似，某些活性成分如虫草素、核苷等物质含量还高于冬虫夏草生药。

锗是一种具有高度生物活性的微量元素，是人体不可缺少的物质之一。锗主要以化合物和络合物的形式存在，分为有无机锗与有机锗两种，无机锗毒性较大，对人体是严格禁用的，有机锗的药理作用和保健功能已引起了人们的重视，尤其是富集在植物和草药中的有机锗被认为是发挥药理作用和保健功能的主要因素。近年来研究表明：有机锗可使人体酶活化，增强细胞活力，促进机体新陈代谢，具有抗肿瘤、消炎与免疫调节、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血脂、促进植物和微生物的生长、改善血液循环、增加携氧量等多重功能，某些药物的医疗保健功能都与之有关。

国内外目前关于富锗蛹虫草菌丝体产品及其培养方法没有相应的报道。

发明内容

为了克服传统蛹虫草发酵菌丝体现有生成技术的不足，本发明提供一种操作简单、培养周期短，菌丝体产率高，无污染，无废弃物，具有补锗功能，可以进行产业化生产的一种富锗蛹虫草菌丝体的培养方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：一种富锗蛹虫草菌丝体的培养方法，其特征在于包括：试管斜面菌种培养即菌种活化→三角瓶液体种子培养→液体种子罐培养→发酵罐发酵培养→板框压滤→热风循环干燥→粉碎→粉末状富锗蛹虫草菌丝体；

所述的试管斜面菌种培养是：配制培养基；配制好培养基后120-123℃灭菌20分钟，冷却后，无菌条件下接入蛹虫草菌种，置于15～28℃恒温培养箱暗培养5～8天；所述的培养基重量配方比例为：葡萄糖1.0％～4.0％，蛋白胨0.5％～1.2％，酵母提取物0.2％～1.2％，琼脂粉1％～2％，用水补充至100ml；其pH值为5.0～7.8；

所述的三角瓶液体菌种培养是：配制培养基，配制好培养基后120-123℃℃灭菌20分钟，冷却后，无菌条件下接入蛹虫草固体斜面菌种，接种量为每100ml液体培养基中接入1cm²固体斜面菌种，置于恒温振荡培养箱15～28℃暗培养5～8天；所述的培养基重量配方比例为：葡萄糖1.0％～4.0％，蛋白胨0.5％～1.2％，酵母浸出粉0.2％～1.2％，用水补充至100ml；其pH值为5.0～7.8；

所述的液体种子罐培养是：配制培养基，配制好培养基后120-123℃灭菌20分钟，装液量为罐体溶剂的60％～80％，灭菌冷却后，无菌条件下接入蛹虫草三角瓶液体菌种，接种量为5％，发酵过程中罐压0.05Mpa，通气量为1∶0.5～1，15～28℃培养2～4天，即可转入发酵罐发酵；所述的培养基重量配方比例为：葡萄糖1.0％～4.0％，蛋白胨0.5％～1.2％，酵母浸出粉0.2％～1.2％，用水补充至100ml；其pH值为5.0～7.8；

所述的发酵罐发酵培养是：配制培养基；配制好培养基后120-123℃灭菌20分钟，冷却后，无菌条件下接入蛹虫草液体菌种，接种量为10％，发酵过程中罐压0.05Mpa，通气量为1∶0.5～1，15～28℃培养2～3天，待菌丝变细或还原糖含量小于0.2％时，即可出罐，收集菌丝体；所述的培养基重量配方比例为：葡萄糖1.0％～4.0％，蛋白胨0.5％～1.2％，酵母浸出粉0.2％～1.2％，豆粕粉0.2％～1.0％，二氧化锗粉末0.02％～0.03％，用水补充至100ml；其pH值为5.0～7.8；