[发明专利]一种筛选抗辐射的核苷酸的方法无效
| 申请号： | 201110213527.9 | 申请日： | 2011-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN102277428A | 公开（公告）日： | 2011-12-14 |
| 发明（设计）人： | 程翠林;王振宇;赵海田;姚磊 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 辐射 核苷酸 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种筛选抗辐射的核苷酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，用剪刀剔除结缔组织和脂肪并剪碎脾脏，将碎脾组织置于平皿内的不锈钢滤网上，所述不锈钢滤网大于等于200目，一手持网，另一手用注射器的针芯轻轻压挤脾组织，使单个核细胞经网入平皿内的PBS液中；吸取PBS液冲洗网；离心后低渗处理去除红细胞，再次离心洗涤，重悬细胞，制成1～5×107个/ml单细胞悬液；以上操作过程中，细胞均置于0～4℃冰浴中，所述离心条件为：2000r/min×5min；
步骤2，将1～5×107个/ml单细胞悬液分布于96孔板中，建立细胞辐照模型：即X线辐照：在30KV、5mA的软X射线仪条件下照射100s～900s；
步骤3，根据步骤2，设计实验分为未辐照组、辐照组、辐照+样品处理组：1～5×107个/ml单细胞悬液接于96孔板，每孔加入180微升等体积的细胞悬液，辐照+样品处理组再加20微升等量不同浓度的核苷酸样品于细胞悬液中，未辐照组与辐照组则补加20微升等体积培养液，在37℃5％CO2培养箱中共孵育2h后，进行辐照，照后24h，采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞致死情况，根据结果依次选择细胞存活率较高的核苷酸；
核苷酸样品对细胞抗辐照致死作用按下列公式计算：
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