[发明专利]一种组织切片的预糊化淀粉包埋剂及制片方法

说明书

技术领域

一种组织切片的预糊化淀粉包埋剂及制片方法属病理诊断的组织切片领域，尤适于对各种生物体液的组织切片。

背景技术

对病理组织检查，通常用到组织切片，对病人来说，意味着要动手术从其身体上取下病灶组织，这是一个痛苦过程，且增加病人经济负担和诊断时间。肿瘤细胞学诊断对于恶性肿瘤的诊断，特别是早期诊断具有重要意义。细胞学诊断在实际应用中有很多优点，方法简便快速，经济，病人痛苦较少，但细胞学诊断有局限性。以前诊断体液的办法是把体液涂在玻璃片上，此法虽然免除了手术取活体组织，但是有如下缺点：涂片厚，细胞重叠；结构不清、细胞量少、免疫染色背景深、非特异性着色、阳性不可靠。脱落的细胞无组织结构，诊断准确率不及活检诊断，难以病理分型。并且涂片面积大容易造成试剂浪费、保存时间短，各种体液只能收集到其中部分细胞，对细胞量少的体液根本无法收集到细胞所以无法对标本进行分析，因此疾病也无法得到诊断。很多诊断仍需进行手术活检，制作组织切片。细胞块石蜡包埋切片法收集到的有核细胞量多、细胞结构清晰，大大提高了细胞学的阳性诊断率，对细胞量较少的标本意义更大。用细胞块做免疫组化，可连续切片，有利于多种抗体联合应用，比较观察，提高了临床疑难病例诊断的准确性，还可回顾性研究。目前，采用细胞块石蜡包埋切片技术的，如“公开号为CN10727779A,名为一种新生物组织和包埋方法”，又如“公开号为CN1329245A, 名为生物组织切片包埋剂”，他们所采用的包埋剂原料是塑料，且组分多，塑料在包埋过程中的聚合反应会产生热量，会遮蔽、破坏细胞内的蛋白质和核酸的成分，无法完整保存细胞，生物切片无法直接进行免疫酶标等组化检测，此外，多组分令制作的要求较高，成本较大。因此，要寻求新的做包埋剂的原料。天然淀粉的颗粒具有微晶结构、对在冷水中的溶解、溶胀以及淀粉酶的作用等具有抗性。将淀粉在一定量的水存在情况下进行加热处理，淀粉颗粒溶胀成为糊状，规则排列的胶束被破坏，微晶消失，并且容易接受酶的作用，这种状态的淀粉称为预糊化淀粉。预糊化淀粉能够在冷水中膨胀溶解，形成具有高粘度的糊液，或成固体状，目前预糊化淀粉只是作食品，化妆品，金属铸造中的粘合剂；在纺织工业中广泛地用作上浆剂；在建筑业中用作水质涂料。目前没有发现预糊化淀粉作包埋剂的报道。 

发明内容

本发明提出的一种组织切片的预糊化淀粉包埋剂及制片方法，其目的是能收集体液中的细胞进行切片检查，并克服塑料包埋剂存在的缺点，且原料来源广泛，价钱便宜。

一种组织切片的预糊化淀粉包埋剂，其特征在于所说的包埋剂是预糊化淀粉。

上述的一种组织切片的预糊化淀粉包埋剂，其特征在于所说的预糊化淀粉是木薯粉、马铃薯粉、面粉、绿豆粉、玉米粉、高粱粉等或其混合粉制作的预糊化淀粉。

上述的一种组织切片的预糊化淀粉包埋剂的制片方法是：

1、标本收集      

适量体液标本，不少于5ml；

2、标本离心浓缩     

将标本置离心机上以1500-2000转/分，离心5-10分钟；

3、将上述离心后的标本上清液弃去，加入适量10%浓度的福尔马林液后；

置于离心机上以1500-2000转/分，离心5-10分钟；

4、包埋            

将步骤3中的标本去除上清液体，按1：1体积比加入预糊化淀粉，与标本混合，搅拌后放进包埋盒；

5、将包埋盒常规固定，脱水，包埋制成石蜡块；

6、组织切片

将石蜡块切片后可进行常规HE染色，特殊染色，免疫组化，分子原位杂交染色等。

淀粉是葡萄糖分子缩合而成的多糖聚合物。通式是(C6H10O5)n，水解到二糖阶段为麦芽糖，化学式是：C12H22O11，完全水解后得到葡萄糖，化学式是：C6H12O6。

本实用新型使用预糊化淀粉包埋剂，原料来源广泛、价钱便宜、操作简单，能收集含细胞量少的体液进行切片检查，因为预糊化淀粉水溶，固化后对体液中的细胞起支撑稳定作用，并克服塑料包埋剂存在的缺点。

具体实施方式

病例一 F1102602  腹腔穿刺液（腹水）病理诊断为 腺癌

病例二 F1102844  腹腔穿刺液（腹水）病理诊断为 腺癌

该两例病例均用离心浓缩后的管壁回流的腹水与等体积的木薯粉或马铃薯粉、面粉、绿豆粉、玉米粉、高粱粉或其混合粉做成的预糊化淀粉搅拌成团，放进包埋盒，常规固定，脱水，包埋制成石蜡块。将此石蜡块切片后进行了常规HE染色，特殊染色，免疫组化染色。最后均确诊为腺癌。

该两病例均是体液中的细胞量太少，用以前的方法无法收集足够细胞制成切片，即不能进行病理诊断。用此方法制成的切片细胞量数量多，切片薄，细胞单层排列．结构清晰，有组织的结构 可连续切片 ，并进行了免疫细胞化学染色。最后病例得到确诊，此标本还永久保存，利于对病人进行病情追踪。