[实用新型]绿色荧光蛋白转基因牛成纤维细胞株制备试剂盒

权利要求书

1.绿色荧光蛋白转基因牛成纤维细胞株制备试剂盒由外包装盒、试剂瓶和无菌装置三部分组成，其特征在于：外包装盒为厚度为2毫米的普通塑料材质，整体为长方体形状，是由盒盖(12)、侧盒盖(11)和盒体(10)组成；试剂瓶优选7个，置于盒体内左侧相应的泡沫内的瓶槽中，泡沫整体大小为盒体内体积的3/5，其上有7个瓶槽，优选瓶槽的安放方式为前面1个，后面2排各3个；无菌装置由无菌塑料袋、独立盒盖、细胞培养板组成，细胞培养板(1)上有9个孔，分别是上部的1个直径200毫米、深20毫米的圆柱形细胞培养大孔(2)，中间的4个上口直径5毫米、深20毫米垂直排列的锥形储液小孔(3)，下部的4个直径30毫米、深20毫米的圆柱形细胞培养小孔(4)。

2.根据权利要求1所述的绿色荧光蛋白转基因牛成纤维细胞株制备试剂盒，其特征在于，外包装盒整体为长方体形状，是由盒盖(12)、侧盒盖(11)和盒体(10)组成，盒盖(12)在一长边与盒体(10)直接相连，侧盒盖(11)则用于加强固定泡沫(7)在盒内的稳定性，盒盖(12)另一长边中央有一由锁(9)与扣(8)组成的锁扣。

3.根据权利要求1所述的绿色荧光蛋白转基因牛成纤维细胞株制备试剂盒，其特征在于，试剂瓶具有7个，分别盛装：a.线性化处理后的绿色荧光蛋白基因的质粒表达载体，即IRES-EGFP质粒，质粒浓度为1微克/微升；b.PEI转染试剂，即聚乙烯亚胺转染试剂；c.DMEM培养基，即Dulbecco改良的Eagle培养基的简称，为质粒和转染试剂的孵育溶液；

d.牛成纤维细胞生长所需培养液，配制方法为按体积百分数于90毫升DMEM培养基中添加10毫升标准胎牛血清；e.真核细胞筛选用氨基糖苷类抗生素G418，浓度为400-500微克/毫升；f.PBS磷酸盐缓冲液；g.细胞传代所需消化液0.25％胰蛋白酶，即按质量百分数于100毫升D-hanks液体即pH 8.0的无钙镁离子的平衡盐缓冲液中添加0.25克胰蛋白酶。

4.根据权利要求1所述的绿色荧光蛋白转基因牛成纤维细胞株制备试剂盒，其特征在于，选用直径30毫米的细胞培养小孔(4)进行细胞培养，在扩大培养时选用直径200毫米、深20毫米的圆柱形细胞培养大孔(2)。