[发明专利]用于在免疫测定中减少白细胞干扰的磁珠

说明书

相关申请的交叉参考

本申请要求2010年6月14日提交的美国专利申请No.12/815,132的优先权，将其全部内容通过引用并入本文。

发明领域

本发明涉及在用于利用免疫测定法测定分析物在血液样品中的存在或浓度的装置和方法中减少或消除来自血沉棕黄层(buffy coat)组分、特别是白细胞的干扰。具体地，本发明涉及通过用受调理作用的磁性消耗珠子(sacrificial bead)和类似地受调理作用的磁性组件修正(amend)血液样品来减少或消除白细胞免疫传感器干扰。

发明背景

为了诊断、筛选、疾病分期、法医分析、妊娠测试和药物测试等等，会对生物样品进行目标分析物的许多实验室免疫测定测试。虽然少数定量测试例如妊娠测试已被简化成用于患者在家中使用的简单试剂盒，但大部分定量测试仍然需要经训练的专业技术人员在实验室环境中使用复杂仪器进行。实验室测试增加了分析成本并且延迟了患者收到结果的时间。在许多情况下，该延迟可能对患者的病况或预后(例如表明心肌梗塞和心力衰竭的标志物的分析)是有害的。在此类和类似危急情况下，有利地是在及时现场护理(point-of-care)时准确、便宜地并且以最短延迟进行此类分析。

许多类型的免疫测定装置和方法已进行了描述。例如，用于成功地测量血液样品中的分析物的一次性传感设备由Lauks在美国专利5,096,669中公开。用于成功地测量特征例如凝血时间的其它设备由Davis等人在美国专利No.5,628,961和5,447,440中公开。这些设备使用读数装置和适合读数装置的筒(cartridge)以测量作为时间函数的血液样品中分析物的浓度和粘度的改变。将美国专利Nos.5,096,669、5,628,961和5,447,440的整个内容和公开内容通过引用并入本文。

属于Miller等人的美国专利申请公布2006/0160164(“‘164申请”)描述了利用免疫参考电极的免疫测定设备；属于Miller等人的美国专利7,682,833描述了利用改进的样品封闭(sample closure)的免疫测定设备；属于Emerson Campbell等人的美国专利申请公布2004/0018577描述了多重杂交免疫测定；属于Davis等人的美国专利7,419,821描述了用于分析物测量和免疫测定的装置和方法，所述每一个专利或公布是共同拥有的并且通过引用整体并入本文。

非竞争性两位点免疫测定法(也称为夹心免疫测定法)通常用于测定生物测试样品中的分析物浓度，用于例如由Abbott Point of Care Inc.开发为免疫测定系统的及时现场分析物检测系统。在典型的两位点酶联免疫吸附测定(ELISA)中，将一种抗体结合至固体载体上以形成固定或捕获抗体，并且将第二种抗体缀合至或结合至信号产生性试剂例如酶以形成信号或标记抗体。在与包含待测量的分析物的样品反应后，分析物被“夹”在固定抗体与信号抗体之间。在清洗掉样品和任何非特异性结合的试剂后，测量保留在固体载体上的信号抗体的量，该量应当与样品中的分析物的量成比例。

电化学检测也已被用于免疫测定，在所述电化学检测中分析物的结合直接或间接引起与电极相邻的电活性物质的活性改变。关于电化学免疫测定的综述，参见Laurell等人,Methods in Enzymology,第73卷,Electroimmunoassay,Academic Press,New York,339,340,346-348(1981)。

在电化学免疫传感器中，分析物与其同源抗体的结合产生了电极上的电活性物质的活性改变，所述电极保持于适当的电化学电势下以引起电活性物质的氧化或还原。存在许多用于满足这些条件的配置或设置。例如，可将电活性物质直接附着至分析物，或可将抗体共价地连接至从无电活性底物产生电活性物质或破坏电活性底物的酶。关于电化学免疫传感器的综述，参见M.J.Green(1987)Philos.Trans.R.Soc.Lond.B.Biol.Sci.316：135-142。