[其他]用于质谱样本手动沉淀的沉淀辅助装置

说明书

技术领域

本实用新型涉及帮助在质谱样本载板上进行手动样本沉淀（最好是生物物质），以通过激光解吸进行电离的方法（最好通过基质辅助激光解吸），以及相应的沉淀辅助装置。 

背景技术

快速、无错的微生物种鉴定在食品分析、生物技术过程的监测和控制、生物武器的检测、尤其是在临床微生物学领域发挥重要的作用。微生物种，也被称为细菌或微生物，通常是用显微镜看见的小生物体，包括细菌、真菌（例如酵母）、显微藻类、原生动物（例如引起疟疾的疟原虫），从某种意义来说，还包括病毒。 

vanBaar在科学评论文章中详细说明了借由质谱检测方法进行细菌鉴定，例如（FEMS微生物学评论，24，2000，193-219：《借由基质辅助激光解吸/电离和电喷雾质谱的细菌特性》）。在大多数情况下，根据已知微生物种的检验和参考质谱通过样本质谱之间的相似性分析的方法实现鉴定。相似性分析涉及为每个参考质谱分配一个相似性指标，该指标是相关参考质谱和样本质谱之间一致性的度量标准（例如，请参见Jarman等人著作的《分析化学》，72[6]，1217-1223，2000：《使用基质辅助激光解吸/电离质谱进行自动细菌鉴定的算法》）。 

近几年，这种简单、低成本的基于MALDI（MALDI=基质辅助激光解吸和电离）飞行时间质谱的微生物种质谱鉴定方法在临床微生物学的日常工作中已经被人们普遍接受。 

质谱鉴定的出发点是少量的微生物种，这些微生物种通常在有营养培养基的皮氏培养皿（琼脂板）等培养皿中培养几小时，通常进行隔夜培养，最多培养几天。目标是琼脂板中生长的每个菌落都只包 含一种单一的微生物种，即，它们形成纯种培养。这种常用的样本制备方法是为了使用接种棉棒在琼脂板上手动提取单一菌落的生物物质，例如，再将生物物质转移到MALDI样本载板上的样本点上。传统的MALDI样本载板的样本点介于6和1536之间，特别是介于48和384之间。如果使用接种棉棒转移的样本的数量刚好能用肉眼看到，则对于质谱检验来说，这多么的量有点高。样本中的一百万个微生物才会使样本可见；适于质谱的最佳数量为100,000个微生物。 

添加溶解了基质的有机溶剂通常可破坏转移的细胞。这会从细胞内释放分子细胞成分，尤其是存在浓度较高的可溶性蛋白质。有机溶剂在风干过程中蒸发，而基质则结晶。此过程中释放的分子细胞成分融入到多晶基质层中。使用新的接种棉棒在MALDI样本载板上制备另外的样本点以防止交叉污染。 

制备后，将MALDI样本载板引入MALDI飞行时间质谱仪，在质谱仪中，通过激光脉冲轰击样本点。这样，解吸并电离了嵌入到基质层中的分子细胞成分以及基质。在质量相关飞行时间后，离子在电场中加速，并对检测器产生影响。在已知质量校准函数的帮助下，将通过检测器测量的离子飞行时间转换为质量电荷比m/z。测量的信号通常可追溯到蛋白质，这些蛋白质特定于微生物种，有时，甚至特定于株系。因此质谱可以解释为分子指纹，并且尤其可以用于微生物鉴定。 

出版物DE102004020885A1涉及在MALDI样本载板上制备微生物来源的样本，以实现从琼脂板自动转移生物物质到MALDI样本载板上的样本点的目标。为此目的，通过传送带将琼脂板传送到机器人并放到3D镜台上。图像处理系统识别琼脂板上分离的菌落并相应地定位采样杆。一次转移使用一个单独的采样杆，以后再转移则更换采样杆。通过从支架释放并且从几毫米的高度落到菌落上的采样杆提取生物物质。这样与菌落接触是为了确保只有生物物质粘附到采样杆上，并且不会将任何琼脂转移到MALDI样本载板上。如果太多的琼脂被转移到MALDI样本载板上，则质谱鉴定的质量会降低，这是因为琼脂会抑制特征蛋白质离子的信号。未提供控制触点的高精度传感器系统。然而，采样杆一定会振动，可以在采样前用水浸湿采样杆以确保采样杆 从菌落粘附足够的生物物质数量，并将其转移到MALDI样本载板上的样本点上。 

例如，在半自动采样系统中，进行自动转移之前，用户通过选择并标记相机拍摄的琼脂板的图像上的单一菌落来选择要转移到MALDI样本载板上的生物物质的单一菌落。