[发明专利]甘草次酸修饰的汉黄芩素脂质体制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种甘草次酸修饰的汉黄芩素脂质体制剂，本发明还公开了这种汉黄芩素脂质体制剂的制备方法。

背景技术

汉黄芩素为唇形科植物黄芩的主要活性成分之一，目前已从黄芩中发现41种黄酮类化合物，其中含量较高且具有明显药理作用的主要是黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩素、汉黄芩苷和千层纸素等。其中汉黄芩素具有影响药物代谢酶(抑制CYP2E1，3A，1A2和UGT的活性)，抑制肝肿瘤细胞的作用，对CCL4、β-半乳糖胺和酒精引起的肝损伤具有保护作用。

甘草的主要有效成分是甘草酸(glycyrrhizin，GL)，在临床上被广泛用于保护肝脏、防止肝硬化和治疗各种急慢性肝炎、支气管炎和艾滋病等。但值得注意的是：GL在体内是经代谢为甘草次酸(glycyrrhetinic acid，GA)后发挥作用的，GA的药效活性明显强于GL。已有研究证实GA在肝细胞膜上的特异性结合部位较GL多得多。Negishi在20世纪90年代初证实了大鼠肝细胞膜组分中含有大量GA特异结合位点，GA与该位点的结合呈可饱和性、高度特异性，且该位点具蛋白质性质；国内也有研究证实了肝细胞表面确存在大量GA受体。国内顾云娣等也从超微水平原位证实GA和GL对离体大鼠肝细胞具有明显的生物膜效应；同时证实肝细胞膜上有与两者相结合的位点，并且GA对肝细胞的膜效应与结合位点均较GL更为显著。这说明以GA修饰脂质体实现主动靶向肝实质细胞是可行的。另外，GA修饰量对脂质体抗肿瘤效果具有较大影响，选择合适的修饰材料比例从而达到更好的靶向抗肿瘤效果有待进一步研究。

发明内容

本发明的目的是制备甘草次酸衍生物修饰的汉黄芩素脂质体，显著提高对肝肿瘤细胞的作用效力，提高对肝癌的治疗效果。

本发明的目的是通过如下措施来达到：

本发明甘草次酸修饰的汉黄芩素脂质体制剂，含下列组分，其重量比为：

本发明中18-GA-Suc的制备方法如下：

具体过程如下：称取一定量的甘草次酸溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，加入N，N-二环己基碳酰亚胺(DCC)、硬脂醇以及少许4-二甲氨基吡啶(DMAP)，80℃下加热反应至完全。旋转蒸发除去DMF，残余物加水溶解，用有机溶剂萃取；萃取液除去有机溶剂，得到淡黄色固体。经质谱检测，确证该淡黄色固体物为18-GA。称取适量18-GA溶于吡啶，加入丁二酸酐以及少许DMAP，油浴下加热反应数小时，至反应完全。旋转蒸发除去吡啶，得褐色固体，重结晶后得白色固体。经¹H-NMR及质谱鉴定为目标产物18-GA-Suc。

本发明采用逆向蒸发法，制备步骤如下：

a.将处方量汉黄芩素溶于水中，形成水相，待用；

b.将大豆磷脂、胆固醇、18-GA-Suc溶解于二氯甲烷中，形成油相，步骤a中水相与油相体积比为1∶1～3；

c.在水浴50～100w超声下将水相缓慢滴加至油相中，超声形成水油均匀的分散乳液；

d.将步骤c乳液在30～40℃下于旋转蒸发仪上旋蒸去除二氯甲烷；待有机溶剂完全挥干后，用探头超声仪进行超声分散，即得到脂质体。

本发明中，汉黄芩素与磷脂、胆固醇的配比直接影响到脂质体的质量，水相与有机相的比例和所使用的缓冲溶液也对其质量有影响。

当固定处方和制备过程中的其他参数不变，仅考察药物和磷脂的比例时，汉黄芩素的平均粒径和包封率如表1所示。

表1.药物和磷脂的比例对脂质体粒径和包封率的影响

从表可以看出，当汉黄芩素和磷脂重量比小于1∶30时，包封率过低；当汉黄芩素和磷脂重量比在1∶40～60范围内，包封率较高，粒径符合要求，因此本发明中药物/磷脂的比例优选为1∶40～60。

当固定处方和制备过程中的其他参数不变，仅考察胆固醇和磷脂的比例时，汉黄芩素的平均粒径和包封率如表2所示。

表2胆固醇和磷脂的比例对脂质体粒径和包封率的影响

从表中可以看出，胆固醇和磷脂的重量比例在1∶5～12范围内，当胆固醇和磷脂的重量比小于1∶6时，包封率较低。当胆固醇和磷脂的重量比例在1∶7～12范围内，包封率和粒径均较好，因此本发明中胆固醇/磷脂的比例优选在1∶7～12。

当固定处方和制备过程中的其他参数不变，仅考察水相和有机相的比例时，汉黄芩素的平均粒径和包封率如表3所示。

表3水相与有机相的比例对脂质体粒径和包封率的影响