[发明专利]一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法

权利要求书

1.一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

a．种子活化培养：分别从酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露保存管中挑取一环，分别接入种子活化培养基中，30~35℃，100~140r/min下好氧培养36~48h，可分别得到活化的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子；

b. 一级种子制备：将上述步骤a制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子按质量百分比为1~5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，30~35℃，100~140r/min下好氧培养36~48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子；

c. 二级种子制备：将上述步骤b制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子按质量百分比为1~5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，30~35℃，100~140r/min下好氧培养36~48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子； 

d．菌渣培养基制备：按下述重量比的原料混合即可得菌渣培养基：四环素菌渣11~13kg，玉米面粉0.2~0.5kg，酶制剂0.4~0.8kg，(NH₄)₂SO₄ 0.1~0.3kg，加水使菌渣培养基中水分含量为75～85％；

e．将上述步骤c制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子，分别按质量百分比为1～10%接种量接入上述步骤d制备的菌渣培养基中，30～35℃，40~80r/min下好氧培养4～6d，然后调节pH为6.5~7.0，在55℃水浴中按质量百分比为0.03%的量加入酵母抽提酶，水解16~24h，升温到80℃使酶失活，待其冷却后，离心、微滤膜过滤，滤液经减压浓缩控制其水分为15~25%，即为酵母浸膏。

2.如权利要求1所述的一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法，其特征在于：

所述种子活化培养基，种子扩大培养基，霉菌培养基，产酶培养基，酶制剂制备方法分别是：

1）种子活化培养基制备：按下述重量比的原料混合即可得种子活化培养基：蛋白胨10g，酵母浸膏10g，葡萄糖20g，水1000ml；

2）种子扩大培养基制备：按下述重量比的原料混合即可得种子扩大培养基：蛋白胨10g，酵母浸膏5g，葡萄糖5g，水1000ml；

3）霉菌培养基制备：按下述重量比的原料配制即可得霉菌培养基：取新鲜去皮土豆200g，切碎后，加1000ml水煮沸20分钟，过滤后滤液用水稀释至1000ml，然后再加入葡萄糖20g即可；

4）产酶培养基制备：按下述重量比的原料配制即可得产酶培养基：四环素菌渣700g，麸皮300g，再加水使产酶培养基水分含量为60~65%；

5）酶制剂制备：从黑曲霉、康宁木霉、绿色木霉保存管中挑取一环，分别接入霉菌培养基中，菌株经活化和扩大培养后，分别以5%的接种量接种于产酶培养基中，28~35℃好氧培养60~72h后，可得生产酵母浸膏所用的酶制剂。