[发明专利]一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用四环素菌渣的方法，尤其是涉及一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法。

背景技术

中国是四环素类抗生素生产大国，年产量居世界首位。然而在四环素生产过程中，会产生大量的废弃菌渣，这些菌渣主要是发酵醪液进行固液分离时形成的菌饼部分，其主要成分是微生物菌丝体、未代谢利用完的有机物、无机盐等。长期以来，抗生素菌渣多采用简单晾晒或烘干后，作为动物饲料或肥料使用，经济附加值较低。更重要的是，菌渣在晾晒或烘干过程中，会散发出一种特殊异味，而且，菌渣因有机质含量高，易引起二次发酵，颜色变黑，产生恶臭味，给周围环境带来危害。

酵母浸膏是以酵母为原料，利用现代生物技术通过酵母细胞自溶破壁和酵母自身的酶系对酵母细胞质进行水解或以酶制剂进行水解，再经一系列的抽提、浓缩等工序得到的粉状或膏状或液体的产品，营养丰富，富含有18 种以上氨基酸、功能性多肽、抗衰老活性因子、膳食纤维和甘露糖，还含有人体不可缺少的核酸、核苷酸和钙，富含B 族维生素及磷、镁、锰、锌、硒等多种微量元素。酵母浸膏被广泛应用于生物发酵、生物工程、生物医药等领域，具体地说，可广泛用于发酵法生产抗生素、氨基酸、有机酸、酶制剂、生物防腐剂、生物材料、维生素、透明质酸等的培养基配制以及生物工程、生物医药等领域。我国目前生产酵母浸膏的厂家较少，但市场需求量较大。由于酵母浸膏生产原料主要是以小麦等粮食作物为原料，价格偏高，因而造成酵母浸膏的生产成本还处在一个比较高的水平，难以达到实际且实惠的应用。

目前还没有一种能利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种生产成本低、制备工艺简单独特、生产周期短、使四环素菌渣得以高效转化、有效避免四环素菌渣不合理使用对环境造成危害的一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法。

本发明通过如下方式实现：

一种利用四环素菌渣好氧生产酵母浸膏的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

a．种子活化培养：分别从酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露保存管中挑取一环，分别接入种子活化培养基中，30~35℃，100~140r/min下好氧培养36~48h，可分别得到活化的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子；

b. 一级种子制备：将上述步骤a制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子按质量百分比为1~5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，30~35℃，100~140r/min下好氧培养36~48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子；

c. 二级种子制备：将上述步骤b制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子按质量百分比为1~5%的接种量，分别接种于种子扩大培养基中，30~35℃，100~140r/min下好氧培养36~48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子； 

d．菌渣培养基制备：按下述重量比的原料混合即可得菌渣培养基：四环素菌渣11~13kg，玉米面粉0.2~0.5kg，酶制剂0.4~0.8kg，(NH₄)₂SO₄ 0.1~0.3kg，加水使菌渣培养基中水分含量为75～85％；

e．将上述步骤c制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子，分别按质量百分比为1～10%接种量接入上述步骤d制备的菌渣培养基中，30～35℃，40~80r/min下好氧培养4～6d，然后调节pH为6.5~7.0，在55℃水浴中按质量百分比为0.03%的量加入酵母抽提酶，水解16~24h，升温到80℃使酶失活，待其冷却后，离心、微滤膜过滤，滤液经减压浓缩控制其水分为15~25%，即为酵母浸膏；

所述种子活化培养基，种子扩大培养基，霉菌培养基，产酶培养基，酶制剂制备方法分别是：

1）种子活化培养基制备：按下述重量比的原料混合即可得种子活化培养基：蛋白胨10g，酵母浸膏10g，葡萄糖20g，水1000ml；

2）种子扩大培养基制备：按下述重量比的原料混合即可得种子扩大培养基：蛋白胨10g，酵母浸膏5g，葡萄糖5g，水1000ml；

3）霉菌培养基制备：按下述重量比的原料配制即可得霉菌培养基：取新鲜去皮土豆200g，切碎后，加1000ml水煮沸20分钟，过滤后滤液用水稀释至1000ml，然后再加入葡萄糖20g即可；