[发明专利]甾体生物碱盐酸盐及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种甾体生物碱盐酸盐及其制备方法和用途。

背景技术

许多天然植物甾体具有明显抗肿瘤活性。龙葵是一种中草药，在国内外广泛用于治疗肝癌、肺癌、乳腺癌等多种实体瘤，皮肤肿瘤以及白血病。澳洲茄边碱、澳洲茄碱以及龙葵碱是龙葵中的主要活性成分，它们是以澳洲茄胺或龙葵胺为苷元的三糖甾体糖苷生物碱。

近年来，关于澳洲茄边碱和龙葵碱的抗肿瘤活性有许多的研究报道。同时，对澳洲茄胺和龙葵碱进行结构修饰，获得具有抗肿瘤活性的新型甾体生物碱类化合物，备受本领技术人员的关注。

发明内容

本发明的发明人对澳洲茄胺和龙葵碱的结构进行修饰，获得了一类结构新颖的甾体生物碱盐酸盐。经体外抗肿瘤活性测试(MTT法)表明：本发明所制备的甾体生物碱盐酸盐具有抗肿瘤活性，具备被研制为新型抗肿瘤药物的前景。

本发明的一个目的在于，提供一种甾体生物碱盐酸盐，所述的甾体生物碱盐酸盐为式1或式2所示化合物：

本发明另一个目的在于，提供一种制备上述甾体生物碱盐酸盐的方法，所述方法的主要步骤是：以孕甾双烯醇酮醋酸酯(式3所示化合物)为原料，依次经双氧水环氧化，叔丁基二甲基硅氯羟基保护，用水合肼还原，二氧化锰醇氧化，硝基甲烷Michael加成，得到中间体3β-叔丁基二甲基硅氧基-20(S)-22-硝基-孕甾-5-烯-16-酮(式4所示化合物)，由式4所示化合物经硼氢化钠还原，锌粉盐酸还原得到目标化合物(式1所示化合物)，由式4所示化合物经锌粉醋酸还原，硼氢化钠还原，稀盐酸脱保护及成盐得到目标化合物(式2所示化合物)。

本发明再一个目的在于，提供上述甾体生物碱盐酸盐的一种用途，即其在制备抗肿瘤药物中的应用。

具体实施方式

本发明所提供的制备式1或式2所示化合物的方法，其合成策略如下：

本发明通过MTT法，以doxorubicin为阳性对照品，测试式1或式2所示化合物对五种肿瘤细胞株：A549(人肺癌细胞)、Colo205(人肠癌细胞)、MDA-MB-435(人乳腺癌细胞)、QGY7703(人肝癌细胞)和HL-60(人白血病细胞)的抗肿瘤活性。测试结果表明：式1所示化合物对Colo205，MDA-MB-231，QGY7703和HL-60的IC₅₀值为6.5-10.7μg/mL；式2所示化合物对HL-60的IC₅₀值为1.04μg/mL。

此外，本发明提供的制备式1和式2所示化合物的方法，其具有反应条件温和、操作简便、立体化学选择性好、及收率较高等优点。

下面通过具体实施例对本发明做进一步阐述，下列实施例中所说的室温是20℃～30℃。

实施例1

式1和2所示化合物的制备：

(1)式5所示化合物的制备

在1000mL圆底烧瓶中，加入30g化合物(3)，500mL甲醇，反应液呈浑浊状，冰浴下搅拌，保持体系温度不高于15℃，依次加入40mL 4mol/L NaOH水溶液(将6.4gNaOH溶于40mL H₂O中)，120mL 30％双氧水，室温反应8h(TLC检测原料反应完全)；将反应液倒入1000mL水中，静置过夜，减压抽滤，将滤饼干燥，得到白色固体26.7g(式5所示化合物)，收率为96.0％，熔点为176-178℃。

(2)式6所示化合物的制备

在1000mL圆底烧瓶中，将26.7g式5所示化合物溶于500mL CH₂Cl₂中，搅拌下，依次加入14.0g TBSCl(澄清)和13.0g咪唑(变浑浊)，室温反应10h(TLC检测原料消失)；将反应液抽滤，除去不溶粘稠物，母液浓缩，用95％乙醇-水重结晶，析出晶体，抽滤，得到白色亮片状固体35.0g(式6所示化合物)，收率为97％，熔点为124-125℃。

(3)式7所示化合物的制备