[发明专利]利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌及其应用

权利要求书

1.一株利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌，其分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BER108，其保藏号编号为：CCTCC NO：M 2012068。

2.权利要求1所述的利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌在发酵生长丁二酸中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于具体步骤为：将固体合成培养基平板培养的大肠埃希氏菌BER108接种到种子培养基中，充二氧化碳培养，37℃培养48 h得到种子液；将种子液接种到发酵培养基中，接种量2%，充二氧化碳发酵培养72h。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述的固体合成培养基平板配方为：柠檬酸 3 g·L^-1，Na₂HPO₄·12H₂O 4 g·L^-1，KH₂PO₄ 8 g·L^-1，(NH₄)₂HPO₄ 8 g·L^-1，NH₄Cl 0.2 g·L^-1，(NH₄)₂SO₄ 0.75 g·L^-1，MgSO₄·7H₂O 1 g·L^-1，CaCl₂·2H₂O 10.0 mg·L^-1，ZnSO₄·7H₂O 0.5 mg·L^-1，CuCl₂·2H₂O 0.25 mg·L^-1，MnSO₄·H₂O 2.5 mg·L^-1，CoCl₂·6H₂O 1.75 mg·L^-1，H₃BO₃ 0.12 mg·L^-1，Al₂(SO4 )₃ 1.77 mg·L^-1，Na₂MoO₄·2H₂O 0.5 mg·L^-1，柠檬酸铁 16.1 mg·L^-1，琼脂20g/L，葡萄糖10g/L。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述的种子培养基配方为：蛋白胨 10g/L，酵母粉 5g/L，NaCl 5g/L。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述的发酵培养基配方为：柠檬酸 3 g·L^-1，Na₂HPO₄·12H₂O 4 g·L^-1，KH₂PO₄ 8 g·L^-1，(NH₄)₂HPO₄ 8 g·L^-1，NH₄Cl 0.2 g·L^-1，(NH₄)₂SO₄ 0.75 g·L^-1，MgSO₄·7H₂O 1 g·L^-1，CaCl₂·2H₂O 10.0 mg·L^-1，ZnSO₄·7H₂O 0.5 mg·L^-1，CuCl₂·2H₂O 0.25 mg·L^-1，MnSO₄·H₂O 2.5 mg·L^-1，CoCl₂·6H₂O 1.75 mg·L^-1，H₃BO₃ 0.12 mg·L^-1，Al₂(SO4 )₃ 1.77 mg·L^-1，Na₂MoO₄·2H₂O 0.5 mg·L^-1，柠檬酸铁 16.1 mg·L^-1，碱式碳酸镁 24~42g/L，葡萄糖30 ~40 g/L。