[发明专利]藤黄酸作为5`-AMP激活的蛋白激酶激动剂的用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种蒽酮类化合物藤黄酸，尤其是涉及一种藤黄酸作为5`-AMP激活的蛋白激酶激动剂的用途。

背景技术

5`-AMP激活的蛋白激酶（5'AMP-activated protein kinase,AMPK）是一种苏氨酸/丝氨酸激酶，被称为“细胞能量代谢的主要调节器”。细胞能量代谢失衡，会引起代谢综合征等多种疾病，严重影响人类的健康。作为能量代谢过程中重要的调节酶，AMPK可以作为代谢综合征的治疗靶点。AMPK由具有催化作用的α亚基（63KD），调节作用的β亚基（30KD）和γ亚基（37~63KD）形成的异源三聚体。

迄今为止，已经发现了AMPK的一些小分子激动剂，如metformin、AICAR、噻唑等，其中的metformin和噻唑已经广泛应用于Ⅱ型糖尿病的治疗。然而，现有的药物存在着特异性差、用量大等缺点。寻找高效、低毒和特异性强的AMPK小分子激动剂，已成为发现新型代谢综合征治疗药物的重要研发方向。

藤黄酸是20世纪60年代从中药藤黄中分离到的蒽酮类化合物(Ollis,W.D.,M.V.J.Ramsay，et al.(1965).The constitution of gambogic acid.Tetrahedron 21(6):1453-1470)。

迄今为止尚未见有关于藤黄酸作为AMPK激动剂及其与之相关用途的研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种藤黄酸作为5`-AMP激活的蛋白激酶激动剂的用途。

所述5`-AMP激活的蛋白激酶激动剂是一种新型的蒽酮类AMPK激动剂，可用于各种因代谢异常引起的疾病（如代谢综合症等）的治疗。

所述藤黄酸（Gambogic acid，简称GB）为：(z)-甲基-3-戊烯基)-;1,5-二亚甲基-1,3,11-三氢-呋喃并(3,4-g)吡喃并(3,2-b)蒽酮-1-巴豆酸，其分子式为C38H44O8，其结构式为：

藤黄酸（GB）为金黄色结晶，旋光度-685°(甲醇)，不易溶于水，在甲醇等有机溶剂中有较好的溶解性。

实验表明，藤黄酸对AMPK在作用较短的时间内即具有较强的激活作用，是AMPK的激动剂。藤黄酸与AMPK具有较强的结合作用，二者的解离常数约为10^-6M，且对AMPK及其下游蛋白质乙酰辅酶A羧化酶（ACC）均具有激活作用，因此藤黄酸可作为5`-AMP激活的蛋白激酶激动剂。

附图说明

图1为藤黄酸与AMPK相互作用的荧光谱图。在图1中，横坐标为波长（nm），纵坐标为荧光强度（a.u.）；由图1表明，藤黄酸对AMPK的内源荧光具有较强的猝灭作用，由此曲线计算得出藤黄酸与AMPK的解离常数为6.3μM；藤黄酸从上至下由0μmol/L至20μmol/L变化。

图2为分子相互作用仪（ＦortBio Octet Red）检测藤黄酸与AMPK的结合。在图2中，横坐标为时间（s），纵坐标为光移动距离（nm）；由图2表明，藤黄酸对AMPK具有较强的结合作用，由此曲线计算得出藤黄酸与AMPK的解离常数为6.1μM；显示藤黄酸与AMPK具有较强的结合作用。

图3为藤黄酸对人宫颈癌细胞HeLa中AMPK的激活作用，同时引起其下游底物乙酰辅酶A羧化酶的磷酸化水平升高；图3显示藤黄酸在作用短时间内,引起HeLa细胞AMPK的磷酸化增强,磷酸化的AMPK进一步引起乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的磷酸化增强,从而影响后续的代谢。藤黄酸对HeLa细胞中AMPK的激活作用。

图4为藤黄酸对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中AMPK的激活作用。激活的AMPK进一步活化其下游底物ACC。由图4可见，藤黄酸对AMPK具有较强的激活作用，2μM的作用浓度,引起的AMPK磷酸化水平与1mmol/L的作用浓度相当，由此可以判断藤黄酸是AMPK的激动剂。

图5为藤黄酸对小鼠脂肪细胞3T3L1中AMPK的激活作用,同时引起其下游底物乙酰辅酶A羧化酶的磷酸化水平升高。图5显示藤黄酸在作用短时间内,引起3T3L1细胞AMPK的磷酸化增强,磷酸化的AMPK进一步引起ACC的磷酸化增强,从而影响后续的代谢。藤黄酸对3T3L1细胞中AMPK具有较强的激活作用。