[发明专利]一种水稻光敏核不育系的分子检测方法及试剂盒无效
申请号: | 201210355874.X | 申请日: | 2012-09-24 |
公开(公告)号: | CN102864227A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 曹孟良;李丁;赵迎曦;夏玉梅;袁隆平;高婧;沈春修;方真 | 申请(专利权)人: | 湖南杂交水稻研究中心;湖南隆平高科基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 袁靖 |
地址: | 410125 湖南省*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水稻 光敏 不育 分子 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种水稻光敏核不育系的分子检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
a.抽提水稻叶片中基因组总DNA;
b.任选以下一对引物对提取的基因组总DNA进行PCR扩增;
GC-D1:
正向引物:GCATGCTTCACCAGCACGTCCA,
反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;
GC-D2:
正向引物:CCCATATATCTTGTCCAGTGCT,
反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;
c.将扩增产物用核酸内切酶进行酶切;
如用引物GC-D1扩增得到的PCR产物用核酸内切酶RsaI进行酶切;如用引物GC-D2扩增得到的PCR产物用核酸内切酶AccI进行酶切;
d.由酶切产物的带谱推出该基因的SNP如果是G,则该材料为光敏核不育系;SNP如果是C,则不是光敏核不育系。
2.根据权利要求1所述的水稻光敏核不育系的分子检测方法,其特征在于,
所述的步骤d中用RsaI酶切,如果SNP是G,得到381bp、224bp和108bp3个条带;如果SNP是C,得到605bp和108bp2个条带;
用AccI酶切,如果SNP是G,无酶切产物;如果SNP是C,得到443bp和334bp2个条带。
3.一种水稻光敏核不育系的分子检测试剂盒,其特征在于,包括:
引物GC-D1:
正向引物:GCATGCTTCACCAGCACGTCCA,
反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG,
和核酸内切酶RsaI;
或者引物GC-D2:
正向引物:CCCATATATCTTGTCCAGTGCT,
反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG,
和核酸内切酶AccI;
或者以上两对引物和两种核酸内切酶。
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