[发明专利]一种水稻光敏核不育系的分子检测方法及试剂盒无效

专利信息
申请号: 201210355874.X 申请日: 2012-09-24
公开(公告)号: CN102864227A 公开(公告)日: 2013-01-09
发明(设计)人: 曹孟良;李丁;赵迎曦;夏玉梅;袁隆平;高婧;沈春修;方真 申请(专利权)人: 湖南杂交水稻研究中心;湖南隆平高科基因科技有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 长沙市融智专利事务所 43114 代理人: 袁靖
地址: 410125 湖南省*** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 一种 水稻 光敏 不育 分子 检测 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种水稻光敏核不育系的分子检测方法,其特征在于,包括如下步骤:

a.抽提水稻叶片中基因组总DNA;

b.任选以下一对引物对提取的基因组总DNA进行PCR扩增;

GC-D1:

正向引物:GCATGCTTCACCAGCACGTCCA,

反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;

GC-D2:

正向引物:CCCATATATCTTGTCCAGTGCT,

反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;

c.将扩增产物用核酸内切酶进行酶切;

如用引物GC-D1扩增得到的PCR产物用核酸内切酶RsaI进行酶切;如用引物GC-D2扩增得到的PCR产物用核酸内切酶AccI进行酶切;

d.由酶切产物的带谱推出该基因的SNP如果是G,则该材料为光敏核不育系;SNP如果是C,则不是光敏核不育系。

2.根据权利要求1所述的水稻光敏核不育系的分子检测方法,其特征在于,

所述的步骤d中用RsaI酶切,如果SNP是G,得到381bp、224bp和108bp3个条带;如果SNP是C,得到605bp和108bp2个条带;

用AccI酶切,如果SNP是G,无酶切产物;如果SNP是C,得到443bp和334bp2个条带。

3.一种水稻光敏核不育系的分子检测试剂盒,其特征在于,包括:

引物GC-D1:

正向引物:GCATGCTTCACCAGCACGTCCA,

反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG,

和核酸内切酶RsaI;

或者引物GC-D2:

正向引物:CCCATATATCTTGTCCAGTGCT,

反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG,

和核酸内切酶AccI;

或者以上两对引物和两种核酸内切酶。

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