[发明专利]一种重组蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201210523964.5 | 申请日： | 2012-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN103045612A | 公开（公告）日： | 2013-04-17 |
| 发明（设计）人： | 闫乃红;蔡素萍;周晓敏;殷燕;王云;刘旭阳;皮耐诺·弗兰克 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/63;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/375;A61K38/16;A61P31/22;A61P27/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 蛋白 制备 方法 | ||
1.SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2.一种重组载体，其特征在于：它包括SEQ ID NO.1或所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：它是pET26b(+)重组载体。
4.一种重组菌，其特征在于：它包括权利要求2或者3所述的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：它为重组大肠杆菌。
6.一种制备重组蛋白的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
（1）取权利要求4或者5所述的重组菌，在大肠杆菌培养基中培养，诱导表达，得菌液，离心，得菌体；
（2）取步骤（1）所得菌体，超声裂解，离心，得上清，分离纯化，即得。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述培养是在含有40~60mg/ml卡那霉素的LB液体培养基中振摇培养，培养温度为37℃。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述诱导表达使用的诱导剂为IPTG，诱导剂的浓度为0.1~1mM，诱导温度为16~37℃，诱导时间为6~18h。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述诱导剂的浓度为1mM，诱导温度为18℃，诱导时间为18h。
10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述分离纯化采用Ni亲和层析柱。
11.权利要求6~10任意一项所述方法制备的重组蛋白。
12.权利要求11所述重组蛋白在制备抗病毒药物中的用途。
13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于：所述抗病毒药物为抗单纯疱疹病毒的药物。
14.根据权利要求13所述的用途，其特征在于：所述抗病毒药物为治疗单疱病毒性角膜炎的药物。
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