[实用新型]一种实时定量PCR测量样品中染色体端粒平均长度的绝对值的试剂盒

说明书

技术领域 本实用新型涉及试剂盒，特别涉及一种实时定量PCR测量样品中染色体端粒平均长度的绝对值的试剂盒。 

背景技术

端粒（Telomere）是一段DNA重复序列，位于染色体末端，可以保持染色体的完整性。1990年，Harley等证实端粒的长度可以随着细胞分裂次数的增多而逐渐变短。这一发现在端粒和细胞衰老之间建立了紧密的联系。端粒重复序列的长度可能起着一种分子钟（molecular clock）的作用。不同年龄的人的体细胞的寿命明显不同，其端粒的长度也不相同。是随着年龄的增长而缩短。来自新生儿的体细胞可在体外传代培养80—90代，来自70岁老人的体细胞在体外只能传代培养20～30代，而且端粒的重复序列长度也缩短很多。 

端粒酶（Telomerase）是细胞中负责端粒延长的一种酶，是基本的核蛋白逆转录酶，可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶能延长缩短的端粒（缩短的端粒其细胞复制能力受限），从而增强体外细胞的增殖能力。 

但是，在正常人体细胞中，端粒酶的活性受到相当严密的调控。实验证明，体细胞里没有端粒酶的活性，所以体细胞每分裂一次，端粒也就缩短一些。随着细胞不断地进行分裂，端粒的长度将越来越短，当达到一个临界长度时，细胞染色体会失去稳定性，使细胞不能再进行分裂而进入凋亡（apoptosis）。端粒的长度决定了细胞的寿命，因此可用丢失的端粒重复序列的长度来推测细胞有丝分裂的次数，所以端粒被称为分子钟或有丝分裂钟（mitotic clock）。端粒除了涉及到染色体稳定性，细胞的衰老和死亡外，还与肿瘤的发生密切相关。在人体内的各种细胞中，生殖细胞和干细胞染色体的末端比体细胞染色体的末端长出几千个碱基对，并且在这两类细胞里能检测到端粒酶的活性。除此之外，其他所有体细胞里都未测得端粒酶的活性。惟一的例外是来源于体细胞的恶性肿瘤细胞却又重新出现了端粒酶活性，发挥其合成端粒重复序列的功能，以补偿正常的端粒序列丢失，使端粒的重复序列不会达到导致细胞死亡的临界长度，从而获得细胞的“永生性”(immortality)。这样，恶性肿瘤细胞在体内或体外都能无限制地分裂增殖。 

上文提到的端粒长度缩短指的是所有染色体末端端粒的平均长度。近年来，很多实验观察开始质疑端粒的平均长度与衰老之间的联系。一些研究小组提出了于端粒相关的细胞衰老是由单一或某几个短端粒引起的观点。这一观点的正确性也被越来越多的实验数据所证明。目前，研究端粒长度主要是应用TRF法（mean length of telomere restriction fragments）。另外，有一些手段可以比较精确的研究染色体中短端粒的情况，例如基于荧光原位杂交（Q-FISH）的技术，或者STELA（single telomere length analysis）技术等。 

 实用新型内容

实用新型目的：

本专利涉及一种实时定量PCR测量样品中染色体端粒平均长度的绝对值试剂盒。