[发明专利]用于亲和层析的洗涤溶液和方法

权利要求书

1.一种使用结合感兴趣的蛋白的亲和层析(AC)基质来生成感兴趣的纯化蛋白的方法，所述方法包括用包含精氨酸的洗涤溶液在大于8.0的pH洗涤AC基质，其中所述洗涤在没有非缓冲盐的情况下进行，且所述方法还包括从AC基质洗脱感兴趣的蛋白，所述AC基质在洗脱感兴趣的蛋白前被平衡，所述AC基质是蛋白A柱，且其中所述感兴趣的蛋白是抗体、包含Fc区的抗体片段或Fc融合蛋白。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包含：

(a)将包含感兴趣的蛋白的混合物加样到AC基质上；

(b)用包含所述精氨酸的洗涤溶液在大于8.0的pH洗涤AC基质；和

(c)从AC基质洗脱感兴趣的蛋白，

其中所述洗涤在没有非缓冲盐的情况下进行，并且所述AC基质在洗脱感兴趣的蛋白前被平衡。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在加样蛋白A柱和/或从蛋白A柱洗脱抗体、抗体片段、或Fc融合蛋白前用平衡缓冲液平衡蛋白A柱。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述pH大于8.5。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述pH为8.5-9.5。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述pH为8.9-9.0。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于，所述pH为9.0。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，所述精氨酸的浓度范围为0.1-0.5M。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述精氨酸浓度为0.25M。

10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述洗涤溶液包含精氨酸-HCl。

11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述洗涤溶液移除的杂质选自高分子量(HMW)物质、宿主细胞蛋白(HCP)和低分子量(LMW)物质。

12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述洗涤溶液包含一种或多种缓冲盐。