[发明专利]一种新的血管抑素滴眼剂及其制备方法

说明书

技术领域：本发明属于药品技术领域，是一种可以防治眼科新生血管性疾病的滴眼剂。

背景技术：眼部新生血管形成是眼科新生血管性疾病的典型的病理性改变，包括由糖尿病等导致的眼视网膜新生血管病变、角膜白斑、新生血管形成性青光眼及脉络膜血管新生等等，若病情迁延及治疗不当可导致病人视力严重下降甚至失明。当前，眼科激光及光敏疗法等手段在临床上的应用在一定程度上可抑制眼部新生血管的形成及发展，但常会导眼部致正常组织受损且易复发，同时治疗费用高昂。寻找一种新的疗效确切且成本低廉的治疗眼科新生血管性疾病的手段成为研究热点。

血管抑素(angiostatin，AS)是一种内源性的新生血管抑制剂，具有特异性的抑制血管内皮细胞增生的作用。研究已发现，血管抑素是血浆纤溶酶原的内部片段，血浆纤溶酶原有5个三环结构，即kringle结构域(K1、K2、K3、K4、与K5)，纤溶酶原蛋白酶原蛋白连的不同位置上有不同纤溶酶原激活物的作用位点，不同的纤溶酶原激活物作用于纤溶酶原将产生不同分子构成的血管抑素。目前已经证实的血管抑素有K1-3、K4、K1-4、K1-4.5与K5等5种。多项实验研究证实，血管抑素对视网膜微血管内皮细胞增生暨视网膜新生血管与角膜新生血管具有明显抑制作用。本发明鉴于血管抑素对眼部新生血管形成的特异性抑制作用，设计制备了一种新的血管抑素滴眼剂，为治疗眼科新生血管性疾病提供有益的参考。

血管抑素抑制眼部新生血管形成的生理功能已经得到证实，然而以血管抑素为原料药制备治疗眼部新生血管性疾病的血管抑素滴眼剂的研究尚很少。有学者采用PBS等为赋形剂制备人Kringle1-5及重组人Kringle5蛋白滴眼剂，但辅料选择局限，未考虑血管抑素本身特殊的生理特点及理化性质，制备工艺简略，未见相关质控研究，以重组人Kringle 1-3为原料药制备血管抑素滴眼剂的研究更是未见先关报道。鉴于血管抑素是机体内的蛋白类生理活性物质，本身具有特殊的理化性质，以重组人Kringle 1-3为例，其干燥冻干粉适宜在-20℃条件下保存较长时间，在2-8℃条件下稳定性不好，一旦重溶于水则稳定性更差；另外，制备滴眼剂后适宜pH与粘度及长时间保存下的防腐抑菌亦需要考虑。本发明综合考虑了上述因素，

考虑到重组人Kringle 1-3水溶性好、稳定性差、属蛋白类生理活性物质等特点，制备了一种新的重组人Kringle 1-3血管抑素滴眼剂。

本发明的目的是：提供一种可用于治疗眼部新生血管性疾病的滴眼剂，该滴眼剂具有组织分布均匀、润湿与润滑作用强、稳定性较好等优点，并提供本滴眼剂的制备方法。

发明内容：本发明的目的在于提供一种可用于治疗眼部新生血管性疾病的血管抑素滴眼剂，该滴眼剂具有组织分布均匀、润湿与润滑作用强、稳定性较好等优点，并提供本滴眼剂的制备方法。

本发明具体为：

(1)缓冲体系的制备：按照以下处方制备磷酸盐溶液适量备用：(1000ml)

(2)配方的选择

(3)制备工艺

将滴眼液级玻璃酸钠(MW 1683200)按0.1％制备量的用量加入到适当体积的磷酸盐缓冲液(PBS)中，溶解备用。称取0.01％制备量的苯扎氯铵，溶解于适当体积的磷酸盐缓冲液(PBS)中，加入玻璃酸钠溶液，向其中加入质量分数为0.1％的EDTA-Na₂，充分混匀，补加蒸馏水至制备量，即得血管抑素滴眼剂赋形剂溶液。将血管抑素滴眼剂赋形剂溶液于超净工作台中用0.22μm微孔滤膜除菌过滤得无菌血管抑素滴眼剂赋形剂溶液，量取适当体积无菌赋形剂溶液溶解适量重组人Kringle 1-3血管抑素原料药，涡旋震荡至澄清透明，配制质量分数为0.01％(即质量浓度为100μg/ml)血管抑素滴眼剂若干，封装，即得本发明重组人Kringle 1-3血管抑素滴眼剂。

本发明的有益效果：(1)本发明制备了一种以重组人Kringle 1-3为原料药的新的血管抑素滴眼剂，能够抑制眼部新生血管形成，可用于治疗眼部新生血管性疾病。(2)本发明采用了玻璃酸钠做为滴眼剂的增稠剂，改善了滴眼剂的粘度，延长了滴眼剂眼内滞留时间，促进滴眼剂在眼内的吸收与分布；同时，玻璃酸钠良好的亲水能力、润滑作用及组织相容性，利于减轻及消除眼部的不适症状，Draize家兔刺激性实验研究表明，本发明制得的滴眼剂对家兔眼部无刺激性。(3)本发明中，乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na₂)做为稳定剂加入到制备处方中，稳定性考察发现重组人Kringle 1-3血管抑素滴眼剂稳定性明显提高；(4)本发明中适宜浓度的苯扎氯铵解决了蛋白类滴眼剂在保存过程中可能的染菌污染的问题；(5)本发明制备工艺中磷酸盐缓冲体系(PBS)保证了滴眼剂适宜的pH值及渗透压，制得的重组人Kringle1-3血管抑素滴眼剂pH值为7.35，渗透压与生理状态一致，符合《中国药典》2010版关于滴眼剂pH及渗透压的相关规定。