[发明专利]一种具有α-1,3-葡聚糖主链的毛蚶多糖及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种具有α-1，3-葡聚糖主链的毛蚶多糖及其制备方法和用途；属于天然高分子领域。 

背景技术

毛蚶(Arca subcrenata Lischke)为软体动物门(Mollusca)双壳纲(Bivalvia)列齿目(Taxodonta)蚶科(Arcidae)，属海产经济贝类。毛蚶常栖息在稍有淡水注入的浅海泥沙中，由于特殊的生长环境，所以肉质肥嫩、味道鲜美，营养价值也很高，可以提高机体的免疫能力，因此引起了国内外学者的关注，目前国内学者已从毛蚶中提取得到一些活性成分。 

海洋中存在着大量具有各种独特性质和生理活性的天然产物，其特异的化学结构是陆生天然活性物质无法比拟的，许多新化学结构是陆生生物所没有的，具有显著的药理作用。多糖是其中一大类海洋生物活性物质，由各种海洋生物中分离的多糖，从来源可分为海洋动物多糖、海藻多糖、海洋微生物多糖，已证明具有各种各样的生物活性和药用功能，如抗肿瘤、抗病毒、抗心血管疾病、抗氧化、免疫调节等。 

动物多糖具有抗肿瘤、提高免疫力作用。研究表明，玉足海参多糖对实验小鼠乳腺癌、肺癌、黑色素瘤均具有显著的生长抑制率。多糖抗癌的原因大多是激活了体内免疫系统，改善了机体免疫力。从皱纹盘鲍中提取的鲍鱼多糖能够明显增加巨噬细胞吞噬能力，增强迟发超敏反应。这种免疫增强作用可能是其抗肿瘤作用的机理。此外还发现三角帆蚌多糖、文蛤多糖、鹿茸多糖、蚕蛹多糖、泥鳅多糖、乌贼墨、鲨鱼软骨素、海参等具有抗肿瘤和增强免疫力的活性。多糖应用于肿瘤治疗将是一个新的迷人的领域。多糖的结构与其生物学功能密切相关，因此近些年具有生物学活性多糖结构的解析是糖化学领域的热点，同时也是一个难点。 

发明内容

本发明的目的是从毛蚶中提取出一种多糖，鉴定其化学结构并确定其具体的活性用途。 

毛蚶多糖重复单元结构如下： 

本发明涉及毛蚶多糖的提取流程见图1，以及其结构鉴定，即从毛蚶中分离得到的毛蚶多糖，经酸水解和GC结果表明，毛蚶多糖为首次从毛蚶中分离得到的一种结构新颖的葡聚糖，并通过化学分析和光谱分析推断出本发明中毛蚶多糖的重复单元结构，含1→3、1→4和1→6三种糖苷键，主链由1→3糖苷键组成，侧链由1→4和1→6糖苷键组成。 

上述毛蚶多糖在50-200μg/mL时对脾淋巴细胞有明显的增殖作用，并且呈一定的剂量依赖性。另外毛蚶多糖可显著地刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7增殖，在25-400μg/mL浓度范围内，与对照组相比有显著性差异(P＜0.05)，并且可以显著促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力。 

有益效果： 

毛蚶多糖为首次从毛蚶中分离得到的一种具有α-1，3-葡聚糖主链的结构新颖的葡聚糖；毛蚶多糖具有显著的免疫增殖作用。 

附图说明

图1是毛蚶多糖提取流程图 

图2是毛蚶多糖水解产物薄层层析图 

图3是毛蚶多糖糖醇乙酸酯的气相色谱图 

图4是NaIO₄溶液的浓度-吸光值标准曲线 

图5是毛蚶多糖Smith降解的气相色谱图 

图6是毛蚶多糖甲基化3次后的红外谱图 

图7是毛蚶多糖紫外分光图谱 

图8是毛蚶多糖红外分光图谱 

图9是毛蚶多糖的¹H NMR图谱 

图10是毛蚶多糖的¹³C NMR图谱 

图11是毛蚶多糖的H-H COSY图谱 

图12是毛蚶多糖的HMBC图谱 

图13是毛蚶多糖的HSQC图谱 

图14是毛蚶多糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖影响图 

图15是毛蚶多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖影响图 

图16是毛蚶多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红的影响图 

具体实施方式

实施例1