[发明专利]一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白无效
| 申请号： | 201310161803.0 | 申请日： | 2013-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN103204945A | 公开（公告）日： | 2013-07-17 |
| 发明（设计）人： | 焦新安;陈祥;孟闯;时振华;徐正中;殷月兰;孙林 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/81;G01N33/68;C12R1/84 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 结核病 诊断 表达 cfp10 esat 融合 蛋白 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白，其特征在于所述蛋白的氨基酸序列SEQ ID NO.1所示。
2.一种制备权利要求1所述CFP10-ESAT-6融合蛋白的制备方法，其特征在于，是通过酵母表达系统进行真核表达和纯化，过程为：将cfp10-esat6片段插入pCR2.1-T载体转化大肠杆菌DH5α，经PCR、酶切及测序筛选出阳性克隆；用EcoRⅠ与XbaⅠ酶切、回收和连接cfp10-esat6与pPICZαA片段，构建重组质粒pPICZαA-cfp10-esat6，转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆并转化毕赤酵母GS115，筛选阳性转化子；甲醇诱导表达重组毕赤酵母，上清液浓缩后进行纯化，并对纯化蛋白进行分析与鉴定。
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