[发明专利]一种快速检测水体中沙门氏菌浓度的方法有效
申请号: | 201310188135.0 | 申请日: | 2013-05-21 |
公开(公告)号: | CN103278543A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 吕保樱;唐艳平 | 申请(专利权)人: | 桂林市产品质量监督检验所 |
主分类号: | G01N27/26 | 分类号: | G01N27/26 |
代理公司: | 桂林市持衡专利商标事务所有限公司 45107 | 代理人: | 唐智芳 |
地址: | 541004 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 水体 沙门氏菌 浓度 方法 | ||
1.一种快速检测水体中沙门氏菌浓度的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)获得多份不同已知浓度的沙门氏菌溶液;
2)确定沙门氏菌与掺硼金刚石膜电极响应电流的依从关系
采用CHI660D电化学工作站用电化学计时电流的方法快速检测沙门氏菌的浓度,以掺硼金刚石膜电极为工作电极,铂丝电极为对电极,饱和甘汞电极为参比电极,设置工作电极的检测电位为0.9~1.15V,电解池中为pH7.2~7.6的磷酸-磷酸盐缓冲溶液;将上述步骤1)获得的多份沙门氏菌溶液逐一进样,记录每次进样时掺硼金刚石膜电极的响应电泳的电流值,根据全部进样的沙门氏菌液浓度和与其对应响应电流的电流值作曲线,得到响应电流-沙门氏菌浓度曲线,该曲线为一直线,确定沙门氏菌与掺硼金刚石膜电极响应电流的依从关系为线性关系;
3)沙门氏菌浓度的快速检测
3.1)按步骤2)中的检测条件,将待测水体样品进样,记录掺硼金刚石膜电极的响应电泳的电流值;
3.2)利用步骤2)确定的响应电流-沙门氏菌浓度曲线,结合上述步骤3.1)记录的电流值读出该电流值对应的沙门氏菌浓度,该浓度即为待测水体的沙门氏菌浓度。
2.根据权利要求1所述的快速检测水体中沙门氏菌浓度的方法,其特征在于:步骤2)中,所述工作电极的检测电位为0.95~1.05V,电解池中为pH7.3~7.5的磷酸-磷酸盐缓冲溶液。
3.根据权利要求1所述的快速检测水体中沙门氏菌浓度的方法,其特征在于:步骤2)中,所述工作电极的检测电位为1.0V,电解池中为pH7.4的磷酸-磷酸盐缓冲溶液。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的快速检测水体中沙门氏菌浓度的方法,其特征在于:步骤1)中,获得多份不同已知浓度的沙门氏菌溶液的具体操作为:取沙门氏菌菌液用无菌生理盐水稀释,分多次取适量稀释液分别注入到多个培养瓶中,计算各培养瓶中沙门氏菌的菌落数,得到多份不同已知浓度的沙门氏菌溶液。
5.根据权利要求4所述的快速检测水体中沙门氏菌浓度的方法,其特征在于:步骤1)中,获得多份不同已知浓度的沙门氏菌溶液的具体操作为:取沙门氏菌菌液用无菌生理盐水稀释,分多次取适量稀释液分别注入到多个培养瓶中,将各个培养瓶中稀释液分别涂布于LB平板上,于35~37℃培养箱中培养24h,通过计算各个LB平板上沙门氏菌的菌落数获得各培养瓶中沙门氏菌的菌落数,从而得到多份不同已知浓度的沙门氏菌溶液。
6.根据权利要求1~3中任一项所述的快速检测水体中沙门氏菌浓度的方法,其特征在于:所述的响应电流-沙门氏菌浓度曲线用于拟合表达掺硼金刚石膜电极的响应电流与沙门氏菌浓度依从关系的公式,拟合得到的公式为ΔI=Kx,其中ΔI为计时电流变化,单位为μA,K为常数,x为沙门氏菌浓度,单位为cfu/mL。
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