[发明专利]一种耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY及其基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY及其基因和应用。

背景技术

真菌α-淀粉酶是由真菌如黑曲霉、米曲霉、根霉等产生的，可以随机水解淀粉内部α-1，4糖苷键，也能水解麦芽三糖，终产物主要为麦芽糖和部分低聚寡糖及少量葡萄糖。一般真菌α-淀粉酶的热稳定性不如细菌α-淀粉酶，具有反应温度温和、作用pH范围较窄等特点。

从20世纪50年代开始，英国和美国相继将真菌α-淀粉酶作为食品添加剂应用于面包生产行业。由于真菌α-淀粉酶所具有的特性，以及现代食品工业、发酵工业等的快速发展，真菌α-淀粉酶在现代工业酶制剂中占有显著地位，其应用也越来越广泛。

目前，真菌α-淀粉酶的工业应用主要表现在：

（1）淀粉糖工业：据统计，2006年，我国淀粉糖产量已经达到600万吨。品种也越来越多，有饴糖、高麦芽糖、超高麦芽果糖、液体葡萄糖、结晶和无水葡萄糖、果葡糖、麦芽糊精、低聚糖、全糖、糖醇等20多个品种，这其中主要以葡萄糖和麦芽糖为主，而且麦芽糖由于其特有的性质，越来越受到人们的关注。真菌α-淀粉酶已逐渐替代β-淀粉酶而成为以淀粉为原料生产麦芽糖浆的关键酶，可生产高麦芽糖和低葡萄糖含量的糖浆，因此在淀粉糖工业中应用越来越广泛。

（2）焙烤制品加工：真菌α-淀粉酶可水解面粉中的淀粉生成小分子糊精，通过酵母的进一步发酵产生醇类物质和二氧化碳，从而使焙烤制品体积增大。在此过程中产生的还原糖在烘焙过程中可参与美拉德反应，有助于改善焙烤制品的外表色泽。添加真菌α-淀粉酶，不仅可以加快生面团的发酵速率、改善焙烤制品的结构和体积，还可以明显改善焙烤制品的口感、色泽及品质等。因此，真菌α-淀粉酶可替代溴酸钾、焦亚硫酸钠等化学改良剂，消除目前焙烤食品加工中所用化学改良剂存在的安全隐患。

（3）酿造行业：真菌α-淀粉酶用于啤酒酿造，可提高麦芽汁的可发酵性；用于黄酒酿制，可改善黄酒酒质，提高出酒率；用于生料酒精行业，可对糖化醪中淀粉进行低温液化，提高酒精得率及降低生产成本。

此外，真菌α-淀粉酶还可作为促消化剂应用于医药；可提高动物的饲料利用率、降低料肉比应用于饲料酶制剂等其它领域。而且随着工业的不断发展，真菌α-淀粉酶的应用领域还会不断扩大。

目前，国内酶制剂企业真菌α-淀粉酶的生产水平较低，同处于世界领先水平的几家国外酶制剂企业相比（发酵水平可达到2000-3000U/g左右），差距很大，没有生产及市场竞争优势。因此，提高真菌α-淀粉酶的生产水平，并改善其相应性状，如提高耐酸性或耐热性能，还可进一步拓宽真菌α-淀粉酶的应用范围，这些都对我国酶制剂的研发及生产具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY。

本发明的另一目的是提供编码上述新型耐酸性真菌α-淀粉酶的基因NTaAMY。

本发明的另一目的是提供包含上述新型耐酸性真菌α-淀粉酶的重组载体。

本发明的另一目的是提供包含上述新型耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY的重组菌株。

本发明的另一目的是提供制备上述新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的方法。

本发明的另一目的是提供上述新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的应用。

本发明提供了一种来自于黑曲霉（Aspergillus niger）的新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY，该新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示：

MSQFIECKATAIQRLPSWHSFSKQLPEFKNRRESTKSQTQLGVNRSLIPPWWRHLQ

AIHS                                                           60

TADKTLHFERVPHAMDATPNPTETYDWFQAHKAGLPTNGNVGVISILVLNGEFDD

AGALG                                                          120

YHWGRVGDLVELERQKNAVRGYDLHFAYDLGCKGTYSPLQYKIVDPDGVDSRAE

QDNGTD                                                         180