[发明专利]一种难溶于水的支架型丝素蛋白膜及其制备与应用

权利要求书

1.一种难溶于水的支架型丝素蛋白膜，其特征在于所述支架型丝素蛋白膜按如下方法制备：（1）以桑蚕蚕丝为原料，经脱胶、溶解、透析，获得截留液a，将截留液a或截留液a的浓缩液过滤或离心，取滤液或上层离心液得到丝素蛋白溶液；（2）将步骤（1）得到的丝素蛋白溶液的质量浓度用水调整至0.3～30%，倒入模具内，所述模具内丝素蛋白溶液加入量以丝素蛋白质量计为2～50mg/cm²模具，将模具在温度10～60℃，相对湿度10～70%条件下干燥至无肉眼可见的水分，在模具内形成丝素蛋白膜；然后将模具于温度50～100℃，相对湿度70～100%条件下放置20～200min，在模具内加入去离子水，冷却至室温，倾去去离子水，在模具内形成难溶于水的丝素蛋白膜，即基底膜；（3）在步骤（2）所述的基底膜表面加入步骤（1）获得的质量浓度0.3～30%丝素蛋白溶液，所述丝素蛋白溶液体积加入量为100～10000ml/m²模具，将模具在水平状态下于-10～-80℃冷冻2～30h，再在-40～-110℃条件下真空冷冻干燥，在模具内形成双层膜，去除模具，将双层膜在温度50～100℃，相对湿度70～100%条件下放置20～200min，然后再置于体积浓度50～90%的乙醇水溶液中浸泡10～60min，再用去离子水充分浸洗，获得难溶于水的支架型丝素蛋白膜。

2.如权利要求1所述的难溶于水的支架型丝素蛋白膜，其特征在于步骤（2）所述丝素蛋白溶液加入量以丝素蛋白质量计为3～20mg/cm²模具。

3.如权利要求1所述的难溶于水的支架型丝素蛋白膜，其特征在于步骤（3）所述丝素蛋白溶液的体积用量为200～4000ml/m²模具。

4.如权利要求1所述的难溶于水的支架型丝素蛋白膜，其特征在于步骤（3）所述模具在-20～-80℃下冷冻5～30h，再在-60～-110℃条件下真空冷冻干燥，形成丝素蛋白膜支架层。

5.如权利要求1所述的难溶于水的支架型丝素蛋白膜，其特征在于步骤（1）所述截留液a的浓缩液制备方法为：将透析后的透析袋放入质量浓度20～60%的聚乙二醇水溶液中，静置1～10h，取截留液b即为截留液a的浓缩液；所述聚乙二醇平均分子量1000～10000。

6.如权利要求1所述的难溶于水的支架型丝素蛋白膜，其特征在于步骤（1）所述截留液a或截留液a的浓缩液过滤或离心方法为下列之一：a）将截留液a或截留液a的浓缩液于4℃、3000～6000g条件下离心5～20min，弃去沉淀，取上层溶液即为所述的丝素蛋白溶液；b）将截留液a或截留液a的浓缩液用孔径为2～20μm的滤器过滤，去除不溶性颗粒，滤液即为所述的丝素蛋白溶液。

7.如权利要求1所述的难溶于水的支架型丝素蛋白膜，其特征在于步骤（1）所述脱胶、溶解、透析方法为：a）脱胶：将100g桑蚕蚕丝放入4～8L的2M碳酸钠水溶液中，90～100℃水浴20～60min，去离子水清洗，该过程重复3次，脱去丝胶蛋白，留下丝素蛋白，将丝素蛋白在20～60℃烘干，获得干燥后的丝素蛋白；b）溶解：将上述干燥后的丝素蛋白溶于9～11M的溴化锂水溶液中，55～65℃水浴30～300min至丝素蛋白充分溶解，获得含丝素蛋白的混合液；所述干燥后的丝素蛋白质量用量以溴化锂水溶液的体积计为0.1～0.2g/ml；c）透析：将含丝素蛋白的混合液用截留分子量1000～20000道尔顿的透析袋进行透析，用10倍混合液体积的无菌去离子水作为透析液在3天透析10～12次，去除溶液中的溴化锂成分，获得截留液a。

8.如权利要求1～7之一所述的难溶于水的支架型丝素蛋白膜在制备防粘连膜、护创膜或人工膜中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于所述的人工膜为牙周膜、引导骨再生膜、胸膜、硬脑膜或硬脊膜。