[发明专利]一种检测抗dsDNA抗体的方法在审
申请号: | 201310539997.3 | 申请日: | 2013-11-05 |
公开(公告)号: | CN103616503A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 辛竹 | 申请(专利权)人: | 辛竹 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁省大*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 dsdna 抗体 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生化实验领域,具体涉及一种检测抗dsDNA抗体的方法。
背景技术
抗dsDNA(dsDNA抗体):对诊断SLE有较高的特异性,且与SLE的活动相平行,并可作为治疗的估价。随着疾病活动的控制,抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。抗dsDNA抗体与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积,或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原造成SLE患者的肾损害。抗dsDNA抗体阳性的患者较阴性患者发生肾炎的危险性高12倍。测定抗dsDNA抗体的方法很多,其中放射免疫法(Farr)敏感,用此法检测其结合率320%为 阳性,短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IF-CT或IF-TE)更特异,此法31:5可判阳性。低滴度的抗DNA抗体也可在多种疾病甚至正常人中出现。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于,针对现有技术缺陷,提供一种技术方案:
一种检测抗dsDNA抗体的方法,步骤如下:先取出所需要的板条,板条事先需要密封,保存在2-5摄氏度的环境下;取出后的板条需要放入密封袋中,待其温度达到室温后再进行下一步;准备好洗涤液,即将浓缩洗涤液中加入30倍体积的纯蒸馏水,然后放置在3-5摄氏度的环境下进行干燥保存;将血清样品用氯化钠溶液进行五倍稀释,然后摇晃均匀;加入吸收液,直至血清样本分层;轻轻摇晃三分钟;35摄氏度下孵育40分钟;然后反复洗涤;干燥;即可。
本发明中,洗涤液中应该加入重量百分比达到百分之30-40的酶连物。
本发明中,所述吸干步骤为,用厚叠吸水纸在上面反复拍打。
本发明的有益效果是:操作简单,成本较低,可以准确进行筛选,重复操作性强,筛选精确。
具体实施方式
一种检测抗dsDNA抗体的方法。步骤如下:先取出所需要的板条,板条事先需要密封,保存在3摄氏度的环境下;取出后的板条需要放入密封袋中,待其温度达到室温后再进行下一步;准备好洗涤液,即将浓缩洗涤液中加入30倍体积的纯蒸馏水,然后放置在3摄氏度的环境下进行干燥保存;将血清样品用氯化钠溶液进行五倍稀释,然后摇晃均匀;加入吸收液,直至血清样本分层;轻轻摇晃三分钟;35摄氏度下孵育40分钟;然后反复洗涤;干燥;即可;洗涤液中应该加入重量百分比达到百分之30-40的酶连物;所述吸干步骤为,用厚叠吸水纸在上面反复拍打本发明中,原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
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