[发明专利]一种有机磷农药快速检测用生物传感器及其检测方法

权利要求书

1.一种固定有酪氨酸酶和1,2-萘醌-4-磺酸钠底物的玻碳电极的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

a、将玻碳电极用氧化铝抛光粉打磨光亮，清洗干净后晾干；

b、将新配置的10μL0.05mol/L的1,2-萘醌-4-磺酸钠溶液滴涂在步骤a得到的裸玻碳电极表面，自然晾干；

c、将10μL20mg/mL的酪氨酸酶和5μL2.5mg/mL的戊二醛溶液一起滴涂在经步骤b处理过的玻碳电极上，在4℃通氮气下晾干，得到经滴涂处理的玻碳电极；

d、将非导电聚合物单体溶于0.05mol/L PH=6.5的磷酸缓冲液中得到浓度为0.05mol/L的非导电聚合物单体溶液，通N₂除氧，然后将步骤c得到的经滴涂处理的玻碳电极泡在0.05mol/L的非导电聚合物单体溶液中经电化学方法聚合得到表面上覆盖有一层非导电聚合物薄膜的玻碳电极，将制作好的目标电极贮存在4℃的磷酸缓冲液中24h以上再使用。

2.根据权利要求1所述的固定有酪氨酸酶和1,2-萘醌-4-磺酸钠底物的玻碳电极的制备方法，其特征在于，所述非导电聚合物单体为间苯二胺，所述非导电聚合物为聚间苯二胺。

3.根据权利要求1或2所述的固定有酪氨酸酶和1,2-萘醌-4-磺酸钠底物的玻碳电极的制备方法，其特征在于，所述电化学方法聚合是在0.8V电压下作用30s。

4.一种有机磷农药快速检测用生物传感器，其特征在于，该传感器以饱和甘汞电极为参比电极，铂片电极为对电极，以权利要求1或2或3得到的固定有酪氨酸酶和1,2-萘醌-4-磺酸钠底物的玻碳电极上作为工作电极。

5.根据权利要求4所述的有机磷农药快速检测用生物传感器，其特征在于，所述有机磷农药选自灭菌磷、碘硫磷、二嗪磷、甲基氯吡硫磷中的任一种。

6.一种有机磷农药快速检测方法，其特征在于该方法将权利要求4或5所述有机磷农药快速检测用生物传感器放入PH=6.5的磷酸缓冲液中，利用计时电流法在电化学工作站上用电流-时间方法扫描，研究酪氨酸酶玻碳电极的电化学行为，包括以下步骤：首先在未加有机磷农药之前测定空白曲线；空白曲线测定好之后，加入配置好的有机磷农药溶液，孵育1min后进行测定，记录不同浓度有机磷农药对酪氨酸酶抑制的曲线。

7.根据权利要求6所述的有机磷农药快速检测方法，其特征在于所述在未加有机磷农药之前测定空白曲线是在30mL0.05mol/L的磷酸缓冲液中通O₂15min后进行扫描，在E=+0.10V下稳定90s；在E=-0.15V下作用15s；在E=+0.10V下恢复60s。

8.根据权利要求6或7所述的有机磷农药快速检测方法，其特征在于所述有机磷农药选自灭菌磷、碘硫磷、二嗪磷、甲基氯吡硫磷中的任一种。