[发明专利]基于选择剂的识别和量化系统及用于在单次分析中识别和量化多种分析物的方法无效
申请号: | 201380013470.5 | 申请日: | 2013-01-30 |
公开(公告)号: | CN104160278A | 公开(公告)日: | 2014-11-19 |
发明(设计)人: | 弗雷德·E·雷尼尔;尼古拉斯·B·赫罗尔德;凯文·W·迈尔 | 申请(专利权)人: | 珀菲尼迪生物科学股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 郑斌;彭鲲鹏 |
地址: | 美国印*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 选择 识别 量化 系统 用于 分析 多种 方法 | ||
1.一种用于同时分析样品溶液中之多种分析物的多维方法,所述方法包括:
向包含待测量分析物的样品溶液中添加亲和选择剂,所述亲和选择剂对所述样品溶液中的所述分析物中的一种或更多种具有亲和力;
允许所述亲和选择剂与所述分析物形成免疫复合物;
在第一维分离中采用选择性吸附技术将所形成的免疫复合物与所述样品溶液中的非分析物物质部分或全部分离;
使所分离的免疫复合物解离;
在第二维分离中采用选择性吸附技术使所解离的免疫复合物中的所述分析物与所述亲和选择剂彼此分离;以及
根据所述分析物的质荷比来解析所述分析物。
2.根据权利要求1所述的方法,其中在柱、筒、移液器吸头、板或珠形式中进行所述第一维分离。
3.根据权利要求1所述的方法,其中在变性的物质上进行所述第一维分离。
4.根据权利要求3所述的方法,其中通过还原和烷基化形成所述变性的物质。
5.根据权利要求1所述的方法,其中酶促修饰在所述第一维分离之前进行。
6.根据权利要求1所述的方法,其中在所述第一维分离之后所述第二维分离之前进行酶促消化。
7.根据权利要求6所述的方法,其中使用胰蛋白酶、lys c、glu c、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶、PNG酶F、葡糖醛酸酶或多种其他酶进行所述酶促消化。
8.根据权利要求1所述的方法,其中在所述第二维分离之后第三维分离之前进行酶促消化。
9.根据权利要求8所述的方法,其中使用胰蛋白酶、lys c、glu c、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶、PNG酶F、葡糖醛酸酶或多种其他酶进行所述酶促消化。
10.根据权利要求1所述的方法,其中串联使用两步酶促修饰,并在它们之间有分离步骤。
11.根据权利要求1所述的方法,其还包括基于离子化分子在载气中的迁移率使用离子迁移分离器来分离在气相中的离子化分子。
12.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一和第二维分离包括以下的至少一种:根据流体力学体积分离,用捕获抗体靶向独特的结构特征,用固定化的亲和素靶向生物素化的特征,从疏水表面上吸附和差异洗脱,从带电表面上吸附和差异洗脱,从固定化的金属亲和螯合剂上吸附和差异洗脱,以及从富含硼酸的表面上吸附和差异洗脱。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述独特的结构特征包括以下的至少一种:所述亲和选择剂特有的天然结构特征、已与所述亲和选择剂缀合的半抗原和与所述亲和选择剂缀合的免疫原。
14.根据权利要求1所述的方法,其中所述分析物包括以下的至少一种:分析物片段、分析物衍生物和分析物同素异构体。
15.根据权利要求1所述的方法,其中所述分析物包括离子化的分析物。
16.根据权利要求1所述的方法,其中所述亲和选择剂包括抗体和抗体片段中的至少一种。
17.根据权利要求1所述的方法,其中所述亲和选择剂包括以下的至少一种:适配体、凝集素、噬菌体展示蛋白受体、细菌蛋白质和寡核苷酸。
18.根据权利要求17所述的方法,其中所述细菌蛋白质包括以下的至少一种:G蛋白、A蛋白以及由生物体产生的用于靶向来自另一生物体之蛋白质的蛋白质。
19.根据权利要求17所述的方法,其中所述寡核苷酸包括RNA、DNA和PNA中的至少一种。
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