[发明专利]用于选择抗细胞凋亡信号传导细胞的装置和方法及其用途

说明书

本发明公开了适于选择对受体介导的细胞凋亡具有抗性的细胞的一种装置和一种试剂盒以及一种使用所述装置和试剂盒的方法。所述装置能够对从引入所述装置中的异源细胞群体中诱导移植物抗宿主疾病(GvHD)的成熟免疫细胞进行阴性选择。所述装置通过现货供应产品‑当前并不存在的溶液来以简化和更廉价的设置实现有效的细胞选择。本发明进一步公开所述装置的用途。

发明领域

本发明涉及医疗装置领域，并且更具体来说涉及目标在于选择对细胞凋亡信号传导具有抗性的细胞的装置，使用所述装置的方法以及其用途。

发明背景

干细胞是可以分裂和分化成多种特殊细胞类型并且自我复制来产生更多干细胞的细胞。在哺乳动物中，干细胞以与胚泡的内细胞团分离的胚胎干细胞或存在于各个组织中的成体干细胞存在。在成体生物中，干细胞和祖细胞用作机体补充成体组织的修复系统。

与依赖于外科手术介入或药物来调节生理活性的所有当前治疗不同，干细胞提供用于功能障碍的或变性的组织的替代物。因此，干细胞在替代疗法中的使用可以显著改变许多当前无法治疗的疾病的预后，恢复受损器官的功能并且校正先天性代谢病症和缺陷。这些细胞在治疗各种各样疾病中的众多临床前和临床使用说明了与干细胞扩展(成体和/或胚胎衍生)相关联的技术的重要性。

最新发展显示包括造血干细胞和祖细胞(HSPC)以及间充质干细胞(MSC)的造血区室内的若干干细胞具有分化成免疫造血系统之外的细胞类型的能力，从而为使用这些细胞类型来用于广大范围变性病症中的组织修复和再生，终止器官衰竭和功能障碍并且可能通过细胞疗法替代器官移植创造了机会。

干细胞的主要临床使用之一是经由造血干细胞移植(HSCT)。在这个手术中，大量细胞从供体转移到接受者体内，目标在于重建接受者的免疫和造血系统。然而在进行这些移植时，人们意识到免疫重建实际上是许多抗化疗性癌症如白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤以及许多实体瘤的最佳疗法。除了在肿瘤学中的用途之外，HSCT还有可能治愈非恶性病症如自身免疫性疾病(例如，糖尿病T1、SLE以及克罗恩病)，先天性代谢缺陷和酶缺陷、血红蛋白病或先天性和后天性免疫缺陷。HSCT已用于非癌症适应症，示出了显著的阳性结果。然而，这种手术当前被采用于危及生命的病状，因为它存在严重的毒性效应，其中最关键的是移植物抗宿主疾病(GvHD)。

当使用这种方法来治疗癌症时，所述方法在大多数情况下在通过激进的放疗-化疗来去除免疫造血系统以便预防移入排斥的清髓性预调节之后进行。宿主的免疫造血系统在移入之前不必去除的最新发现是一个重大进步，因此将用非清髓性预调节和强度降低的调节(RIC)来替代清髓性预调节。非清髓性预调节的使用已显著(尚未充分)改善由生命器官功能障碍、移入失败以及顽固性感染引起的危及生命的情况。由于宿主的造血系统并未通过RIC去除，所以它在供体细胞移入失败的情况下可以恢复。随着时间的推移，供体移植物接管促进移植物抗肿瘤(GvT)和移植物抗自身免疫(GvA)反应的产生的过程，还另外使患者暴露于GvHD的临界发病率和死亡率。

1型跨膜蛋白/粘附分子(作为造血干细胞的标记物的唾液黏蛋白CD34)的鉴别使得能够将CD34+细胞选择用作浓缩造血干细胞来用于移植目的的手段。CD34标记物并不存在于一些干细胞中，但却存在于各种亚型血液前体上。使用这种阳性选择方法导致了一些有益干细胞的损失。此外，所述阳性选择方法产生了干细胞和祖细胞与一些后期前体细胞的混合细胞群体。

这种混合细胞群体的移植降低了移植成功率[Askenasy N.等,Current StemCell Research and Therapy 2006；1:85-94]。因此，产生了对保留造血重建所需的所有细胞同时又丢弃引起副作用的细胞的选择方法的需求。