[发明专利]一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法

权利要求书

1. 一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）原料前处理：将干燥原料桑叶粉碎至20-40目，得粉料；

（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中加入干燥原料重量6-10倍的水，升温至40-50℃，然后加入干燥原料重量的0.05-0.20%的组合酶，酶解3-5h，过滤，得滤渣；

（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣使用3-4个提取装置连续组合提取，每个提取装置中的滤渣提取3-4次，每次提取所用溶剂为干燥原料重量6-9倍的亲水溶剂，提取温度为70-90℃，提取时间为1.8-2.2h，提取后，合并提取液，过滤；

所述亲水溶剂为含酸性溶液的亲水溶剂，所述酸性溶液的体积分数为0.2-0.4%；

（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/3-1/2，冷却至20-30℃，用质量分数为1-2%的碱液调节pH至8-9，然后加入相当于调节pH值后浓缩液重量3-4倍的醇溶液，搅拌10-15min后，静置3-4h，管式离心，离心速率为10000-14000r/min，得离心液；

（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液常温下在压力为25-35bar条件下，使用孔径为5-10kDa的有机超滤膜进行超滤处理，得超滤透过液，然后常温下在压力为0.5-1.5MPa条件下，使用孔径为300-800Da的纳滤膜进行纳滤处理，得纳滤透过液；

（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤透过液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/6，得浓缩液；

（7）干燥：将步骤（6）所得的浓缩液进行干燥后，即得产品。

2.根据权利要求1所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，加入的组合酶为纤维素酶与果胶酶，其中纤维素酶:果胶酶=2-4:1，w/w。

3.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述亲水溶剂为甲醇或乙醇，所述酸性溶液为质量分数37.5%的盐酸、质量分数98%的硫酸或甲酸。

4.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述减压浓缩的温度为60-80℃，真空度为-0.08～-0.04MPa。

5.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述碱液为氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液或碳酸氢钠溶液。

6.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述醇溶液为体积分数80-95%的乙醇溶液。

7.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（5）中，所用超滤膜的材质为聚碳酸酯、聚砜或聚丙烯腈；所用纳滤膜的材质为CA膜、CTA膜或芳族聚酰胺复合膜。

8.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（6）中，所述减压浓缩的温度为70-80℃，真空度为-0.08～-0.06MPa。

9.根据权利要求1或2所述的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，其特征在于，步骤（7）中，所述干燥为真空干燥或喷雾干燥。